作为促卵泡激素受体(fsh-r)拮抗剂的吡咯并苯并二氮杂以及杂环甲酰胺衍生物的制作方法
作者：NG体育 发布时间：2024-06-07 09:13:36
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专利名称：作为促卵泡激素受体(fsh-r)拮抗剂的吡咯并苯并二氮杂以及杂环甲酰胺衍生物的制作方法
本申请要求2005年5月12日提交的美国临时专利申请第60/680,235号优先权的权益，其通过整体引用而并入本文。
背景技术：
本发明涉及对FSH受体有拮抗剂活性的吡咯并苯并二氮杂及其衍生物，以及它们作为避孕药的用途。
女人的生育取决于女性生殖系统的几个隔室的动态相互作用。下丘脑-垂体-性腺轴协调一系列影响卵巢和子宫-子宫内膜隔室的事件，所述隔室导致成熟卵子生成、排卵以及最后受精所需的适当条件。具体地说，下丘脑释放出来的促黄体生成激素释放激素(LHRH)引起促性腺激素、黄体化激素(LH)和促卵泡激素(FSH)由垂体释放。这些激素通过促使粒状和膜细胞增殖和分化，直接作用于卵巢以促进选中的卵泡的发展。FSH刺激雄激素芳构化为雌激素，并增加膜细胞内LH受体的表达。卵泡进而分泌类固醇(雌二醇、黄体酮)和肽(抑制素、活化素)。在月经周期的卵泡期，雌二醇和抑制素水平递增，直至排卵。抑制素减少垂体腺的FSH分泌，同时雌二醇作用于下丘脑和垂体，引起中期LH峰，由此导致排卵。后来，排卵后，破裂的卵泡形成黄体，黄体生成黄体酮。卵巢激素又通过经典的长负反馈机制，调节促性腺激素的分泌。这些控制机制的阐明提供了开发有效策略以控制生育的机会，包括加强生育和避孕。至于FSH作用的近期回顾，参见“FSH action and intraovarian regulation(FSH作用与卵巢内调节)”，B.C.J.M.Fauser编辑，Parthenon PublishingGroup，第6卷，1997以及A.J.Hsueh、T.Bicsak、X-C.Ja、K.D.Dahl、B.C.J.M.Fauser、A.B.Galway、N.Czwkala、S.Pavlou、H.Pakoff、J.Keene、I.Boime，“Granulosa Cells as Hormone TargetsThe Role ofBiologically Active Follicle-Stimulating Hormone in Reproduction(粒细胞作为激素靶点生物活性促卵泡激素在生育中的作用)”，Rec.Prog.Horm.Res.45，209-227，1989。
目前的激素避孕方法本质上是甾体的(黄体酮和雌激素)，调节促性腺激素分泌的长反馈抑制，并影响外周机制，例如精子移动和受精。开发FSH(FSH-R)受体特异性拮抗剂，将提供供选的激素避孕方法。这种拮抗剂会阻碍FSH-介导的卵泡发展，导致排卵阻塞，由此产生预期的避孕效果。引起对抗性卵巢综合症(导致妇女不孕)的机制提供了对这种方法有效性的支持。这些妇女的不孕是非功能性FSH受体导致的(K.Aittomaki、J.L.D.Lucena、P.Pakarinen、P.Sistonen、J.Tapainainnen、J.Gromoll、R.Kashikari、E.-M.Sankila、H.Lehvaslaiho、A.R.Engel、E.Nieschlag、I.Huhtaniemi、A.de IaChapelle“Mutations in the Follicle-Stimulating Hormone Receptor GeneCauses Hereditary Hypergonadotropic Ovarian Failure(促卵泡激素受体基因突变导致遗传的高促性腺激素性卵巢衰竭)”Cell，82，959-968，1995)。这种避孕方法也可适用于男人，因为先天性男性不孕显得与FSH结合位置的减少有关。此外，选择性FSH缺乏的男人是具有正常睾丸激素水平的寡精子症或无精子症患者，并呈现正常的男性第二性征(G.Lindstedt、E.Nystrom、C. Matthews、I.Ernest、P.O.Janson、K.Chattarjee，Clin.Lab.Med.36，664，1998)。因此，具有口服活性的低分子量FSH拮抗剂可以提供通用的避孕新方法。可以预期这种拮抗剂妨碍卵泡发展，从而妨碍排卵，同时保持足够的雌激素产生和对骨质量的有益作用。
通过将激素结合到只在卵巢内表达的特异性跨膜G蛋白偶联受体，来介导FSH作用，致使激活腺嘌呤环化酶系统并提高第二信使cAMP的细胞内水平(A.Mukherjee、O.K.Park-Sarge、K.Mayo，Endocrinology，137，3234(1996))。
发明概述 本发明的一些实施方式包括式I化合物
或其药学上可接受的盐， 其中 R1和R2独立选自氢、(C1-C6)烷基、卤素、氰基、三氟甲基、羟基、(C1-C6)烷氧基、-OCF3、羧基、(C1-C6烷氧基)羰基、-CONH2、-CONH[(C1-C6)烷基]、-CON[(C1-C6)烷基]2、氨基、(C1-C6)烷基氨基或-NHCO[(C1-C6)烷基]； R3是选自氢、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羟基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、-C(O)(C1-C6)烷基或卤素的取代基； B为
其中Q为
其中R5、R6、R7、R8、R9和R10独立选自氢、烷基、(C1-C6)烷基、烷氧基、(C1-C6)烷氧基、羟基烷基、羟基(C1-C6)烷基、烷氧基烷基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、(C1-C6烷基)羰基、(C2-C6)烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C8)环烷基、甲酰基、(C3-C8)环烷基羰基、羧基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C3-C8环烷基)氧基羰基、芳基(C1-C6)烷氧基羰基、氨基甲酰基、-O-CH2-CH＝CH2、被1至3个卤素原子取代的(C1-C6)烷基、三卤代甲基、三氟甲基、卤素、OCF3、烷硫基、(C1-C6)烷硫基、-C(O)烷基、任选被烷基取代的-C(O)芳基；羟基、-CH(OH)烷基、-CH(烷氧基)烷基、硝基、-SO2烷基、(C1-C6)烷基磺酰基、氨基磺酰基、(C1-C6)烷基氨基磺酰基、-SO2NHR11、-SO2N(R11)2、-OC(O)N[(C1-C6)烷基]2、-CONH[(C1-C6)烷基]、-CON[(C1-C6)烷基]2、-(CH2)PCN、 (C1-C6)烷基氨基、二-(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)烷基二-(C1-C6)烷基氨基、-(CH2)PNR13R14、-(CH2)PCONR13R14、-(CH2)PCOOR12、-CH＝NOH、-CH＝NO-(C1-C6)烷基、三氟甲基硫基、
或
R11和R12各独立为氢、C3-C8环烷基或(C1-C6)烷基； R13和R14各独立为氢、C3-C8环烷基或(C1-C6)烷基； 或者R13和R14可以与其连接的氮一起形成任选包含O、S或N的4至6元饱和环； P为0或1； R为
基团； R15为氢或(C1-C6)烷基； Z具有式-L-M； L具有式
其中t为1至2的整数； R16选自氢或(C1-C6)烷基， M选自
其中R17和R18为任选取代的芳基； R19、R20、R21和R22各自独立为(C1-C6)烷基； R23为烷基、C1-C6烷基或任选取代的(C6-C20)芳烷基。
本发明的其它实施方式提供了制备这些化合物或其药学上可接受盐的方法。
通过阅读本说明书和权利要求书的其余部分，本发明的其它实施方式对于本技术领域的技术人员将是显而易见的。
发明详述 在一些实施方式中，本发明提供了式(I)化合物
或其药学上可接受的盐， 其中 R1和R2独立选自氢、(C1-C6)烷基、卤素、氰基、三氟甲基、羟基、(C1-C6)烷氧基、-OCF3、羧基、(C1-C6烷氧基)羰基、-CONH2、-CONH[(C1-C6)烷基]、-CON[(C1-C6)烷基]2、氨基、(C1-C6)烷基氨基或-NHCO[(C1-C6)烷基]； R3选自氢、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羟基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、-C(O)(C1-C6)烷基或卤素； B为
其中Q为
其中R5、R6、R7、R8、R9和R10独立选自氢、烷基、(C1-C6)烷基、烷氧基、(C1-C6)烷氧基、羟基烷基、羟基(C1-C6)烷基、烷氧基烷基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、(C2-C7)酰氧基(C1-C6)烷基、(C1-C6烷基)羰基、(C2-C6)烯基、(C2-C6)炔基、(C3-C8)环烷基、甲酰基、(C3-C8)环烷基羰基、羧基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C3-C8环烷基)氧基羰基、芳基(C1-C6)烷氧基羰基、氨基甲酰基、-O-CH2-CH＝CH2、被1至3个卤素原子取代的(C1-C6)烷基、三卤代甲基、三氟甲基、卤素、OCF3、烷硫基、(C1-C6)烷硫基、-C(O)烷基、任选被烷基取代的-C(O)芳基；羟基、-CH(OH)烷基、-CH(烷氧基)烷基、硝基、-SO2烷基、(C1-C6)烷基磺酰基、氨基磺酰基、(C1-C6)烷基氨基磺酰基、-SO2NHR11、-SO2N(R11)2、-OC(O)N[(C1-C6)烷基]2、-CONH[(C1-C6)烷基]、-CON[(C1-C6)烷基]2、-(CH2)PCN、(C1-C6)烷基氨基、二-(C1-C6)烷基氨基、(C1-C6)烷基二-(C1-C6)烷基氨基、-(CH2)PNR13R14、-(CH2)PCONR13R14、-(CH2)PCOOR12、-CH＝NOH、-CH＝NO-(C1-C6)烷基、三氟甲基硫基、
或
R11和R12各独立为氢、C3-C8环烷基或(C1-C6)烷基； R13和R14各独立为氢、C3-C8环烷基或(C1-C6)烷基； 或者R13和R14可以与其连接的氮一起形成任选包含O、S或N的4至6元饱和环； P为0或1； R为
基团； R15为氢或(C1-C6)烷基； Z具有式-L-M； L具有式
其中t为1至2的整数； R16选自氢或(C1-C6)烷基， M选自
其中R17和R18为任选取代的芳基； R19、R20、R21和R22各自独立为(C1-C6)烷基； R23为烷基、C1-C6烷基或任选取代的(C6-C20)芳烷基。
这里所用酰基，是指R-C(＝O)-，其中R是含1至6个碳原子的烷基。例如，C2-C7酰基是指R为含1至6个碳原子的烷基的R-C(＝O)-。一种适宜的酰基是乙酰基。
这里所用烯基，是指含1个或多个C＝C的烃基。烯基的例子包括但不限于，乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、丁二烯基、戊二烯基和己二烯基。在一些实施方式中，烯基可以被至多4个取代基取代，如下所述。所述烯基适宜为2至6个碳的基团。
这里所用烷氧基，是指-O-烷基。烷氧基的例子包括甲氧基、乙氧基、丙氧基(如正-丙氧基和异丙氧基)、叔-丁氧基等。烷氧基可以包含1至约20个、1至约10个、1至约8个、1至约6个、1至约4个，或1至约3个碳原子。在一些实施方式中，烷氧基可以被至多4个取代基取代，如下所述。
烷氧基烷基，单独使用或与其它术语联用，是指前面所述的烷氧基进一步与未取代的(C1-C10)直链烃或未取代的(C2-C10)支链烃以共价键结合。烷氧基烷基的例子包括但不限于，例如但不限于以下的化学基团甲氧基甲基、-CH2CH(CH3)OCH2CH3以及同系物、异构体等。在某些实施方式中，所述烷氧基烷基为(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基或(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基。
烷氧基羰基，单独使用或与其它术语联用，除另有说明外，这里是指前面所述的烷氧基进一步与羰基形成酯。烷氧基羰基的例子包括但不限于，例如以下的化学基团，甲氧基羰基、乙氧基羰基、异丙氧基羰基、仲-丁氧基羰基、叔-丁氧基羰基、癸氧基羰基以及同系物、异构体等。
烷基是指直链或支链的饱和烃基。烷基的例子包括但不限于，甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(如正-丙基和异丙基)、丁基(如正-丁基、异丁基、仲-丁基、叔-丁基)、戊基(如正-戊基、异戊基、新戊基)等。烷基可以包含1至约20个、1至约10个、1至约8个、1至约6个、1至约4个，或1至约3个碳原子。在一些实施方式中，烷基可以被至多4个取代基取代，如下所述。低级烷基是指含至多6个碳原子的烷基。
烷基氨基，单独使用或与其它术语联用，是指具有一个烷基的部分，其中所述烷基是未取代(C1-C6)直链的之前定义的烷基，或者未取代的(C3-C8)的之前定义的环烷基。烷基氨基的例子包括但不限于例如以下的化学基团，-NH(CH3)、-NH(CH2CH3)、-NH-环戊基以及同系物等。
这里所用烷基氨基磺酰基，除非另作说明，是指前面所述的烷基氨基部分进一步与磺酰基键合。
这里所用烷基磺酰基，是指R-S(O)2-，其中R是前面所述的烷基。
这里所用炔基，是指含一个或多个C≡C的烃基。炔基的例子包括但不限于，乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基等。在一些实施方式中，炔基可以被至多4个取代基取代，如下所述。所述炔基适宜为2至6个碳原子的炔基。
这里所用芳酰基，是指Ar-C(＝O)-基，其中Ar为如下所述的芳基。例如，C6至C14芳酰基是指Ar为芳族的6至14元或5至13元碳环的Ar-C(＝O)-基。
这里所用芳基，是指包括单环或多环芳烃的芳族碳环基，例如苯基、1-萘基、2-萘基、蒽基、菲基等。在一些实施方式中，芳基有5至约20个碳原子。在一些优选的实施方式中，芳基是任选包含至多4个，优选至多2个取代基的苯基或萘基，如下所述。所述芳基适宜为6至14个碳原子的基团。
这里所用芳族烷基或芳烷基，是指-烷基-芳基，其中芳基如前所述。优选地，芳烷基的烷基部分是低级烷基，也就是C1-C6烷基，更优选C1-C3烷基。芳烷基的例子包括但不限于，苯甲基和萘基甲基。在一些优选的实施方式中，芳烷基可以任选被至多4个，优选至多2个取代基取代。
这里所用芳氧基，是指-O-芳基，其中芳基如前所述，例如但不限于，苯氧基。
这里所用氨基甲酰基，是指-C(＝O)N＜基。
羰基，单独使用或与其它术语联用，这里是指，除非另作说明，二价的一个碳进一步与氧原子以双键键合。例子如
这里所用羧基，是指-COOH。
这里所用氰基，是指-CN。
这里所用环烷基，是指包括环化的烷基、烯基和炔基的非芳族碳环基。环烷基可以是单环(如环己基)或多环(如2、3或4个稠合环)的环系统。环烷基的例子包含但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环戊烯基、环己烯基、环己二烯基、环庚三烯基、降冰片基(norbornyl)、降蒎烷基(norpinyl)、降蒈烯基(norcarenyl)、金刚烷基(adamantyl)等。环烷基的定义还包括一个或多个芳族环与环烷基环稠合(也就是有共用键)的基团，例如环戊烷的苯并衍生物(茚满基)、环己烷的苯并衍生物(四氢萘基)等。
这里所用环烷基烷基，是指式-烷基-环烷基，例如环丙基甲基。所述烷基适宜为如上所述的C1至C6烷基，且所述环烷基如上所述。
这里所用环烷基羰基，是指式-羰基-环烷基，例如环己基羰基。所述环烷基如上所述。
二烷基氨基，单独使用或与其它术语联用，除非另作说明，是具有两个独立烷基的部分，其中烷基是未取代(C1-C6)直链的之前定义的烷基，或未取代(C3-C8)的之前定义的环烷基。这两个基团可以连接在一起形成未取代的(C1-C6)-亚烷基-基团。二烷基氨基的例子包括但不限于例如以下的化学基团，-N(CH3)2、-N(CH2CH3)2、-NCH3(CH2CH3)、
以及同系物等。
二烷基氨基烷基，单独使用或与其它术语联用，除非另作说明，是如前所述的二烷基氨基进一步与含1至6个碳原子的直链烷基以共价键结合。二烷基氨基烷基的例子包括但不限于例如以下的化学基团，-CH2N(CH3)2、-CH2CH2N(CH2CH3)2、-CH2CH2CH2NCH3(CH2CH3)，以及同系物等。
卤代或卤素包括氟、氯、溴和碘。
Hnig′s碱是N，N-二异丙基乙胺，这里也称为i-Pr2NEt。
这里所用羟基，是指-OH。
羟基烷基，单独使用或与其它术语联用，这里是指，除非另作说明，末端被羟基取代的(C1-C10)直链烃，例如(C1-C6)烷基。羟基烷基的例子包括但不限于例如以下的化学基团，-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH，和更高级的同系物。
硝基，单独使用或与其它术语联用，这里是指-NO2。
这里所用被取代，是指例如含1至约5个取代基，且更优选1至约3个取代基的芳基或杂芳基的基团，所述取代基独立选自卤素原子、氰基、硝基、羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。优选的取代基是卤素原子、羟基或C1-C6烷基。
烷硫基，单独使用或与其它术语联用，这里是指硫与烷基(例如如上所述的(C1-C6)烷基)以共价键结合。
在本说明书的不同地方，本发明化合物的取代基以组或范围的方式公开。特别地，期望本发明包括这些组和范围的成员的每个单独的子组。例如，术语C1-C6烷基特别意指单独公开甲基、乙基、丙基、异丙基、正-丁基、仲-丁基、异丁基等。
一些实施方式提供了这种化合物，其中R15和R16各为氢；且t为1。还有其它实施方式提供了化合物，其中M选自
在其它实施方式中，本发明提供了这种化合物，其中M选自
在一些实施方式中，Q为
因此，B的结构式为
在一些实施方式中，本发明提供了化合物，其中R1、R2和R3各为氢。
在一些实施方式中，本发明提供了式I化合物，其结构式为
或其药学上可接受的盐。在一些这种实施方式中，R5选自H或C1-C3烷基。在一些其它实施方式中，R8和R9独立选自H、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基。
在其它这种实施方式中，R5选自H或C1-C3烷基；且R8和R9独立选自H、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基。在一些其它实施方式中，M为
其中，R17为任选取代的芳基。在一些实施方式中，R17为任选被1至3个选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和卤素的取代基取代的苯基。在一些实施方式中，C1-C3烷氧基是甲氧基。
在一些实施方式中，R5选自H或C1-C3烷基；且R8和R9独立选自H、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基，且M为
其中，R18为任选取代的芳基。在一些实施方式中，R18为任选被1至3个选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和卤素的取代基取代的苯基。在一些实施方式中，所述卤素为氯。
在一些实施方式中，R5选自H或C1-C3烷基；且R8和R9独立选自H、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基，且 M为
其中，R19为C1-C6烷基，优选甲基。
在一些实施方式中，R5选自H或C1-C3烷基；且R8和R9独立选自H、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基，且M为
其中，R20为C1-C6烷基，优选甲基。
在一些实施方式中，R5选自H或C1-C3烷基；且R8和R9独立选自H、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基，且 M为
其中，R21和R22各独立为C1-C6烷基。在一些实施方式中，本发明提供了这种化合物，其中R21与R22相同。在一些实施方式中，R21和R22各为甲基。
在一些实施方式中，R5选自H或C1-C3烷基；且R8和R9独立选自H、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基，且M为
在一些实施方式中，R5选自H和C1-C3烷基；且R8和R9独立选自H、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基，且M为
其中，R23为任选取代的C6-C20芳烷基，优选苯甲基。
在一些实施方式中，本发明提供了权利要求1的化合物，其中M为
其中，R17为任选取代的芳基。在一些实施方式中，本发明还提供了这种化合物，其中R17为任选被1至3个选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和卤素的取代基取代的苯基。在一些实施方式中，所述R17的C1-C3烷氧基为甲氧基。
在一些这种实施方式中，M为
其中，R18为任选取代的芳基。在一些这种实施方式中，R18为任选被1至3个选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和卤素(优选氯)的取代基取代的苯基。
在其它实施方式中，本发明提供了式I化合物，及其药学上可接受的盐，M为
其中，R19为C1-C6烷基，优选甲基。
在其它实施方式中，本发明提供了式I化合物，及其药学上可接受的盐，其中M为
其中，R20为C1-C6烷基，优选甲基。
在其它实施方式中，本发明提供了式I化合物，及其药学上可接受的盐，M为
其中，R21和R22各自独立为C1-C6烷基。在一些实施方式中，R21与R22相同。在一些这种实施方式中，R21和R22各为甲基。
在其它实施方式中，本发明提供了式I化合物，及其药学上可接受的盐，其中M为
在其它实施方式中，本发明提供了式I化合物，及其药学上可接受的盐，其中M为
其中，R23为任选取代的C7-C20芳烷基，优选苯甲基。
在一些实施方式中，Q为
且因此，B的结构式为
本技术领域的技术人员通过阅读本说明书和权利要求书将很容易理解其它实施方式。
式I的示例性化合物包括但不限于下表中这些
实施本技术的人员会很容易理解，一些本发明化合物根据各种取代基定义，可以包含一个或多个不对称中心，并且可以产生对映异构体和非对映异构体。本发明包括所有的立体异构体，包括具有所述活性的单独非对映异构体和拆分的对映体纯R和S立体异构体；以及外消旋体和R和S立体异构体的所有其它混合物，及其药学上可接受的盐。通过本技术领域技术人员公知的标准程序可以获得纯的光学异构体。也可被理解的是，本发明包括所有可能的具有所述活性的区域异构体(regioisomers)、E-Z异构体、内-外异构体，及其混合物。通过本技术领域技术人员公知的标准程序可以获得这种纯的异构体。
实施本技术的人员会很容易理解，一些本发明化合物根据各种取代基定义，可以由于位阻旋转而为手性，并且产生阻转异构体，通过本技术领域技术人员公知的标准程序可以拆分并获得这种纯的异构体。本发明也包括本发明化合物的所有多型体和水合物。
本发明还包括式I化合物药学上可接受的盐。“药学上可接受的盐”是指式I化合物与药学上可接受的碱加成而得的相应的盐。“药学上可接受的”是指一种物质从毒理学角度来看在药学应用中是可接受的，并且不会与活性成分发生不利的相互作用。药学上可接受的盐，包括单盐和双盐，包括但不限于衍生自有机酸或无机酸的盐，所述有机酸或无机酸例如但不限于乙酸、乳酸、柠檬酸、肉桂酸、酒石酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、丙二酸、扁桃酸、苹果酸、草酸、丙酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、乙醇酸、丙酮酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、水杨酸、苯甲酸以及类似公知可接受的酸。
本发明的其它实施方式提供了制备上述式I化合物或其药学上可接受盐的方法，其中所述方法包括使式(2)三氯乙酰化合物
其中，R1、R2、R3和B如上所述。
与式(3) RH (3) 适当取代的伯胺或仲胺，其中R如上所述，在足以生成式(I)化合物的条件下进行反应。在一些实施方式中，所述反应在1，4-二烷、二甲基亚砜或两者的存在下进行。在一些实施方式中，所述反应在有机碱的存在下进行。在一些实施方式中，所述有机碱是叔胺，优选三乙胺或N，N-二异丙基乙胺。在一些实施方式中，所述反应在例如但不限于乙腈的溶剂中进行。在有溶剂存在时，所述反应在约室温至该溶剂回流温度的温度下进行。
在一些实施方式中，式(2)三氯乙酰化合物用以下方法制备使式(1)的三环氮杂
其中，R1、R2、R3和B如上所述， 与全卤代烷酰卤，在足以生成预期式(2)三氯乙酰化合物的条件下进行反应。在一些实施方式中，所述全卤代烷酰卤是三氯乙酰氯。在一些实施方式中，所述反应在有机碱(例如但不限于N，N-二异丙基乙胺)存在下在疏质子有机溶剂中进行。所述有机溶剂可以是任何适当的疏质子有机溶剂，例如但不限于二氯甲烷或1，4-二烷。在一些这种实施方式中，所述反应在约-10℃至约室温的温度下进行。
本发明一些实施方式提供了制备式I化合物的方法，所述方法包括使式(4)化合物
其中，R1、R2、R3和B如上所述， 其中W为OH或卤素，与式(3) RH (3) 适当取代的伯胺或仲胺，其中R如上所述，在足以生成权利要求1的式(I)化合物的条件下偶合。在一些实施方式中，W为Cl或Br。在一些实施方式中，式(4)酰卤与式(3)取代胺在叔胺存在下在疏质子溶剂中进行偶合。适当的疏质子溶剂包括但不限于，二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺和四氢呋喃。示例性的叔胺是N，N-二异丙基乙胺。在一些实施方式中，式(4)酰卤与式(3)取代胺在约室温至所述溶剂回流温度的温度下进行偶合。
在其它实施方式中，W为OH。
酰胺化 在一些实施方式中，所述偶合包括在至少一种活化试剂或偶合试剂的存在下，使羧酸(4)与式(3)的伯胺或仲胺在足以生成式(I)化合物的条件下进行反应。适当的活化试剂包括但不限于，在疏质子溶剂中的三光气，在1-羟基苯并三唑存在下的N，N-二环己基碳二亚胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐；或者在疏质子溶剂中的N，N’-羰基二咪唑。在一些这种实施方式中，所述反应在有机碱(例如但不限于叔胺)存在下进行。所述有机碱可以是但不限于，N，N-二异丙基乙胺。
在一些实施方式中，所述反应在催化剂(例如但不限于4-(二甲基氨基)吡啶)存在下进行。
在一些实施方式中，所述偶合试剂选自羟基苯并三唑四甲基脲六氟磷酸盐(hydroxybenzotriazole tetramethyluroniumhexafluorophosphate)、叠氮化磷酸二苯酯(diphenylphosphoryl azide)、二乙基氰基膦酸酯(diethylcyanophosphonate)或苯并三唑-1-基-氧基-三-(二甲氨基)辚六氟磷酸盐。
酰化 本发明一些实施方式提供了制备式I化合物的方法，所述方法包括使式(4)化合物
其中，R1、R2、R3和B如上所述， 其中W为Cl或Br，是通过转化其中W为OH的式4化合物而制备的，与式(3) RH (3) 适当取代的伯胺或仲胺，其中R如上所述，在足以生成式(I)化合物的条件下进行偶合。在一些这种实施方式中，所述转化步骤包括使其中W为OH的式4化合物与亚硫酰卤或乙二酰卤反应。在一些实施方式中，在至少一种无机碱(例如但不限于碳酸钾)和有机碱存在下在疏质子溶剂中进行转化。在一些实施方式中，所述有机碱包括但不限于吡啶、4-(二甲氨基)吡啶，或者叔胺，例如但不限于三乙胺。适当的疏质子溶剂包括但不限于二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺和四氢呋喃。在一些实施方式中，转化在约-5℃至约50℃的温度下进行。
本发明的一些实施方式提供了制备式I化合物的方法，所述方法包括在足以生成式(I)化合物的条件下，使式(1)三环二氮杂
其中，R1、R2、R3和B如上所述， 与双光气和式(3) RH (3) 的伯胺或仲胺，其中R如上所述，在疏质子溶剂中进行反应。任何适当的疏质子溶剂可以使用，包括但不限于，二氯甲烷。在一些实施方式中，所述反应在有机碱(例如但不限于三乙胺)存在下进行。
化合物制备的一般合成流程 本发明化合物可以依照下述一般方法中的一种或多种来制备。
通式(I)化合物，其中B为
且 Q为
或
可以方便地如流程I所示制备。
流程I
依照上述优选方法，在有机碱(例如但不限于N，N-二异丙基乙胺)(Hünig′s碱)的存在下，在约-10℃至约室温的温度下，式(1)三环氮杂，其中R1、R2、R3和B如前所述，与全卤代烷酰卤，优选三氯乙酰氯，在疏质子有机溶剂(例如但不限于，二氯甲烷或1，4-二烷)中进行反应，获得所需的式(2)三氯乙酰中间体。然后，式(2)中间体与式(3)适当取代的伯胺或仲胺，在回流的1，4-二烷中进行反应，或者与二甲基亚砜任选在有机碱(例如三乙胺)存在下，在例如但不限于乙腈的溶剂中，在约室温至该溶剂回流温度的温度下，进行反应，获得所需的式(1)化合物，其中R1、R2、R3和B如前所述。
另一优选的方法如下流程II所示。
流程II
依照上述优选方法，在约-10℃至约室温的温度下，用碱水(例如但不限于氢氧化钠)在有机溶剂(例如但不限于四氢呋喃或丙酮)中水解式(2)三氯乙酰中间体，获得式(4)中间体酸。随后与式(3)的伯胺或仲胺的偶合所需的羧酸(4)的活化可以通过几种途径实现。因此，可以通过在约-5℃至约50℃的温度下，在疏质子溶剂(例如但不限于二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃)中与亚硫酰氯、亚硫酰溴、乙二酰氯或乙二酰溴或本技术领域公知的类似试剂反应，将式(4)中间体转化为酰卤，优选式(5)的酰氯或酰溴，其中J为COCl或COBr，获得中间体酰化的衍生物(5)，该反应可以在不存在其他物质时(neat)，或者在无机碱(例如但不限于碳酸钾)存在下，或者在有机碱(例如但不限于吡啶、4-(二甲基氨基)吡啶或叔胺(例如但不限于三乙胺))存在下进行。然后，在化学计量Hünig′s碱的存在下，在疏质子溶剂(例如但不限于二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃)中，在约室温至溶剂回流温度的温度下，式(5)酰基氯或酰基溴，其中J为COCl或COBr，与式(3)适当取代的伯胺或仲胺，进行偶合，获得所需的式(I)化合物，其中R1、R2、R3和B如前所述。
或者，酰化物质可以是相应羧酸的混合酸酐，例如但不限于，依照Inanaga等人在Bull.Chem.Soc.Jpn.52，1989(1979)中的方法，用2，4，6-三氯苯甲酰氯在疏质子有机溶剂(例如但不限于二氯甲烷)中，处理式(4)所述酸而制得的酸酐。在疏质子溶剂(例如但不限于二氯甲烷)中，在约室温至溶剂回流温度的温度下，用式(3)适当取代的伯胺或仲胺处理式(5)所述混合酸酐，获得所需的式(I)化合物，其中R1、R2、R3和B如前所述。
或者，通过在疏质子溶剂(例如但不限于二氯甲烷)中，用三光气处理所述酸，然后在约-10℃至约室温的温度下，使活化中间体与式(3)适当取代的伯胺或仲胺，在有机碱(例如但不限于Hünig′s碱)存在下进行反应，以有效地实现式(4)羧酸的酰胺化。
制备本发明式(I)化合物(其中R1、R2、R3和B如前所述)的另一优选方法包括，在1-羟基苯并三唑的存在下，用活化试剂，例如但不限于N，N-二环己基碳二亚胺或1-乙基-3-(3-二甲基氨基-丙基)碳二亚胺盐酸盐，处理式(4)的酸，然后在约-10℃至约室温的温度下，在疏质子溶剂(例如但不限于二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃)中，优选在有机碱(例如但不限于Hünig′s碱)和催化量4-(二甲基氨基)吡啶的存在下，使活化的中间体与式(3)适当取代的伯胺或仲胺反应。
在另一优选的方法中，可以通过在疏质子溶剂(例如但不限于二氯甲烷或四氢呋喃)中，温度范围从约-10℃至溶剂的回流温度，用其它活化剂(例如但不限于N，N′-羰基二咪唑)处理，来活化式(4)的酸。随后，活化的中间体咪唑化合物(imidazolide)与式(3)适当取代的伯胺或仲胺反应，获得所需的式(I)化合物，其中R1、R2、R3和B如前所述。
或者，可以通过用羟基苯并三唑四甲基脲六氟磷酸盐作为偶合试剂，在-10℃至约室温的温度下，在有机碱(例如但不限于Hünig′s碱)存在下，在例如但不限于N，N-二甲基甲酰胺的溶剂中，有效地实现式(3)适当取代的伯胺或仲胺与式(4)所述酸的偶合，获得所需的良好分离产量和纯度的式(I)化合物，其中R1、R2、R3和B如前所述。
相关的偶合试剂，例如但不限于，叠氮化磷酸二苯酯、二乙基氰基膦酸酯、苯并三唑-1-基-氧基-三-(二甲氨基)六氟磷酸盐，以及其它所有文献中已知在肽合成中用于形成酰胺键的偶合试剂，也可以用于制备式(I)化合物，其中R1、R2、R3和B如前所述。
由式(4)中间体羧酸制备式(I)化合物所用的方法的最终选择，是基于其与R1、R2、R3和B基团的相容性，以及其与式(1)三环二氮杂的反应性。
制备(I)的另一优选方法如流程III所示。式(1)三环二氮杂与双光气在疏质子溶剂(例如但不限于二氯甲烷)中，优选在有机碱(例如但不限于三乙胺)的存在下反应，然后所得酰化中间体与式(3)适当取代的伯胺或仲胺反应，获得所需的式(I)化合物，其中R1、R2、R3和B如前所述。
流程III
流程I的式(I)三环二氮杂，其中B为
且 Q为
或
可以方便地如流程IV所示制备。
流程IV
因此，在无机碱(例如但不限于碳酸钾)存在下，或者在有机碱(例如但不限于吡啶、4-(二甲基氨基)吡啶或者叔胺，例如但不限于三乙胺、N，N-二异丙基乙胺或N，N-二甲基苯胺)存在下，在疏质子溶剂(例如但不限于，二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃或1，4-二□烷)中，在约-5℃至约50℃，用适当取代的酰化剂，例如但不限于芳酰卤，优选式(7)适当取代的酰基氯或酰基溴(其中J为COCl或COBr，其中B的最终选择是基于其与本反应流程的相容性)处理式(6)的三环二氮杂，获得通式(1)的中间体。
或者，式(7)的酰化物可以是相应羧酸的混合酸酐，例如但不限于，依照Inanaga等人在Bull.Chem.Soc.Jpn.52，1989(1979)中的方法，用2，4，6-三氯苯甲酰氯在疏质子有机溶剂(例如但不限于二氯甲烷)中处理所述酸而制得的酸酐。在例如但不限于二氯甲烷的溶剂中，在例如但不限于4-(二甲基氨基吡啶)的有机碱存在下，用式(6)三环二氮杂处理通式(7)所述的混合酸酐，温度范围从约0℃至溶剂的回流温度，获得流程IV的中间体酰化衍生物式(1)。
最终选择式(7)的酰化中间体，是基于其与B基的相容性，以及其与式(6)三环二氮杂的反应性。
流程IV的所需式(7)中间体，其中B为(a)，可以方便地用流程V所示方法来制备。因此，式(8)适当取代的芳基碘、芳基溴、芳基氯或三氟甲烷磺酸芳酯，其中Pg为羧酸保护基，优选Pg为烷基或苯甲基，M为I、Br、Cl或OTf，且R5、R6和R7如前所述，与式(9)的芳基三(烷基)锡(IV)衍生物，其中T为Sn(烷基)3，优选为Sn(正-丁基)3，其中R8、R9和R10如前所述，在Pd(0)催化剂的存在下，在存在或不存在无机盐(例如LiCI或铜(I)盐)时反应，以获得式(10)中间体的酯。随后通过水解、氢解或本技术领域公知的类似方法暴露羧基官能团，然后活化式(11)中间体的酸，获得所需的式(7)化合物，其中R5、R6、R7、R8、R9和R10如前所述，适合与式(6)的三环二氮杂偶合。
流程V
流程IV的所需式(7)中间体，其中Q为(b)，可以用流程V示例的类似方法来制备，用适当取代的萘基中间体替代式(9)的中间体。
或者，流程V的所需式(10)中间体，其中Q为(a)，可以通过将式(8)的碘化物、溴化物、氯化物或三氟甲烷磺酸酯(其中M为I、Br、Cl或OTf)与式(9)适当取代的芳基硼衍生物(其中优选T为B(OH)2)，在钯催化剂(例如但不限于乙酸钯(II)或四(三苯基膦)钯(0))和有机碱(例如但不限于三乙胺)或无机碱(例如但不限于碳酸钠、碳酸钾或碳酸铯)的存在下，加入或不加入四丁基溴化铵或四丁基碘化铵，在混合溶剂(例如但不限于，甲苯-乙醇-水、丙酮-水、水或水-乙腈)中，在约室温至溶剂的回流温度下，进行偶合制备(Suzuki，Pure & Appl. Chem.66，213-222(1994)、Badone等人，J.Org.Chem.62，7170-7173(1997)、Wolfe等人，J.Am.Chem.Soc.121，9559(1999)，Shen，Tetr.Letters.38，5575(1997))。卤化物与硼酸中间体Suzuki偶合的确切条件的选择是基于底物和取代基的性质。流程V的所需式(10)中间体可以类似地由式(8)溴化物(其中M为Br)和式(9)硼酸，在例如但不限于二□烷的溶剂中，在磷酸钾和钯(0)催化剂的存在下来制备。
或者，式(9)的芳基卤或三氟甲烷磺酸酯，其中T为Br、I或OTf，与式(8)频那醇(pinacolato)衍生物，其中M为
B(OH)2、或SnBu3，进行钯催化的交叉偶合反应，获得所需的式(10)中间体，采用流程V的方式将其转化为式(1)化合物。
流程V的所需式(10)中间体，其中Q为(b)，可以通过用适当取代的萘基中间体替代式(9)中间体的类似方式来制备。
流程V所需的式(8)适当取代的芳基卤，其中M为Br或I，可以从商业上采购，或者是本技术领域公知的，或者容易地通过以下方法定量、高纯度地获取将式(8)相应取代的苯胺(其中Pg为H、烷基或苯甲基，且M为NH2)重氮化，接着分别基本上依照Street等人，J.Med.Chem.36，1529(1993)和Coffen等人，J.Org.Chem.49，296(1984)中的方法，使中间体重氮盐与碘和碘化钾在酸性水介质中反应，或者与溴化铜(l)反应(March，Advanced Organic Chemistry，第3版，第647-648页，John Wiley & Sons，New York(1985))。
或者，流程V的所需式(11)中间体，其中Q为(a)，可以方便地如流程VI所示来制备，使式(13)适当取代的硼酸频那醇酯，其中R8、R9和R10如前所述，与式(14)的三氟甲烷磺酸芳基酯(其中W为OTf)或者芳基卤(其中W为Br或I卤化物)，其中R5、R6和R7如前所述，进行交叉偶合反应，该反应依照Ishiyama等人，Tetr.Lett.38，3447-3450(1997)和Giroux等人，Tetr.Lett.38，3841-3844(1997)的一般方法，然后将式(15)的中间体腈进行碱水解或酸水解(cf.March，Advanced Organic Chemistry，第3版，John Wiley & Sons，New York，第788页，(1985))。
流程VI
或者，式(12)的碘化物、溴化物、氯化物或三氟甲烷磺酸酯，其中L为Br、Cl、I或OTf，与式(14)的硼酸或三烷基锡(IV)衍生物(其中W为B(OH)2或SnBu3)进行反应，获得所需的式(15)中间体，其用流程VI的方式被转化为式(11)化合物。
流程VI的所需式(15)中间体，其中Q为(b)，可以通过用适当取代的萘基中间体替代式(13)中间体的类似方式来制备。
流程VI的所需式(13)苯基硼酸酯，可以方便地通过式(16)的联硼酸频那醇酯与式(12)适当取代的芳基卤(优选溴化物或碘化物，其中L为Br、I)或三氟甲烷磺酸芳基酯(其中L为OTf)的钯催化交叉偶合反应来制备，依照Ishiyama等人，J.Org.Chem.60，7508-7510(1995)和Giroux等人，Tetr.Lett.38，3841-3844(1997)中公开的方法进行。
或者，流程IV的所需式(1)化合物，其中Q为(a)，可以采用流程VII所示方法来制备。
流程VII
因此，使用前面所述任何方法，用适当取代的酰化剂(例如但不限于式(17)的卤代芳酰卤，优选碘代芳酰氯或溴代芳酰溴，其中J为COCl或COBr，且K为I或Br，其中R5、R6和R7如前所述)，处理式(6)的三环二氮杂，获得流程VII通式(18)的酰化中间体。
或者，式(17)的酰化物可以是相应羧酸的混合酸酐。依照前面所述方法，用式(6)的三环二氮杂对所述通式(17)的混合酸酐进行处理，获得式(18)中间体酰化的衍生物。
最终式(17)酰化中间体的选择，是基于其与R5、R6和R7基的相容性，以及其与式(6)三环二氮杂的反应性。
式(18)的化合物(其中K为I)与适当取代的有机锡试剂，例如但不限于式(9)的三烷基锡(IV)衍生物，优选三-正-丁基锡(IV)衍生物，T为SnBu3，其中R8、R9和R10如前所述，在例如但不限于四(三苯基膦)钯(0)的催化剂存在下，在例如但不限于甲苯和N，N-二甲基甲酰胺的疏质子有机溶剂中，在约室温至约150℃，进行Stille偶合反应(cf.Farina等人，J.Org.Chem，59，5905(1994)和其中所引用的参考文献)，获得所需的式(1)化合物，其中R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、R9和R10如前所述。
或者，式(18)化合物，其中K为Cl、Br或I，与式(9)适当取代的芳基硼酸，其中T为B(OH)2，其中R5、R6、R7、R8、R9和R10如前所述，在例如但不限于甲苯-乙醇-水的混合溶剂中，在钯(0)催化剂和例如但不限于碳酸钠的碱存在下，在室温至溶剂的回流温度下进行反应，获得所需的式(1)化合物，其中R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、R9和R10如前所述。
流程VII优选的式(17)取代的芳酰基氯或者芳酰基溴，其中K为I或Br，且J为COCl或COBr，其中R5、R6和R7如前所述，可以商业上采购，或者是本技术领域公知的，或者可以容易地用文献中已知化合物的类似方法来制备。
流程VII的式(9)中间体，其中T为Sn(烷基)3，烷基优选为正-丁基，可以商业上采购，或者可以方便地如流程VIII所示由式(19)相应的溴起始原料(其中R8、R9和R10如前所述)来制备，首先将它们与正丁基锂反应，然后使锂化的中间体与三烷基(优选三甲基或三-正-丁基)氯化锡(IV)，优选三甲基氯化锡(IV)或三-正-丁基氯化锡(IV)进行反应。
流程VIII
优选的式(9)取代芳基硼酸，其中T为B(OH)2，可以商业上采购，或者是本技术领域公知的，或者可以容易地用文献中已知化合物的类似方法来制备。
流程VII的所需式(1)化合物，其中B为为(b)，可以通过用适当取代的萘基中间体替代式(9)中间体的类似方式来制备。
或者，如流程IX所示，式(20)适当取代的芳酰基卤，优选芳酰基氯(其中J＝COCl)，其中R5、R6和R7如前所述，与式(6)三环二氮杂反应，获得式(21)中间体溴化物。然后(21)与六烷基-二-锡(优选六-正-丁基-二-锡(IV))在例如四(三苯基膦)钯(0)的钯(0)催化剂和氯化锂或铜(1)盐存在下反应，获得式(22)锡烷中间体。接下来，式(22)的三-正-丁基锡(IV)衍生物与式23的适当取代芳基卤(其中M＝溴或碘)，其中R8、R9和R10如前所述，在例如四(三苯基膦)钯(0)的钯(0)催化剂存在下反应，获得所需的式(1)化合物，其中Q为(a)，且R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、R9和R10如前所述。
流程IX
流程IX的所需式(1)化合物，其中Q为(b)，可以通过用适当取代的萘基中间体替代式(23)中间体的类似方式来制备。
或者，流程IX的所需式(1)化合物，其中Q为(a)，可以如流程X所示来制备。
流程X
因此，式(24)适当取代的联苯，其中R5、R6、R7、R8、R9和R10如前所述，用一氧化碳在式(6)三环二氮杂、钯(0)催化剂(优选PdBr2(Ph3P)2)和叔胺(优选正-三丁基胺)的存在下，在例如但不限于茴香醚或二□烷的溶剂中，在约室温至溶剂的回流温度下进行处理(cf.Schoenberg等人，J.Org.Chem.39，3327(1974))，获得所需的式(1)化合物，其中R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、R9和R10如前所述。
以类似的方式，可以制备流程X的式(1)化合物，其中Q为(b)，条件是用适当取代的萘基中间体替代式(24)的中间体。
制备流程I所需的通式(I)化合物的优选方法(其中B选自如前所述的(a)或(b))如流程XI所示。
流程XI
因此，式(25)的三环二氮杂，其中R1、R2和R3如前所述，带有保护基(Pg)，保护基(Pg)例如但不限于芴基烷氧羰基，优选芴基甲氧羰基(Pg为Fmoc)，或者烷氧羰基保护基，优选叔丁氧羰基(Pg为Boc)，其与全卤代烷酰卤，优选三氯乙酰氯，在有机碱(例如但不限于N，N-二异丙基乙胺(Hünig′s碱)或叔胺(例如但不限于三乙胺)存在下，在约-10℃至约室温，任选在催化量的4-(二甲基氨基)吡啶存在下，在疏质子有机溶剂(例如但不限于二氯甲烷)中反应，获得所需的式(26)三氯乙酰中间体。然后与式(3)的伯胺或仲胺在流程I的条件下反应，获得式(27)中间体酰胺，其中Pg为Boc，然后将其脱保护(式(28)中间体)，并酰化为所需的式(I)产物。或者，通过在二甲基亚砜存在下，在疏质子溶剂(例如但不限于乙腈)中，在溶剂的回流温度下，用式(3)的伯胺处理式(26)中间体(其中Pg为Fmoc)，用单一步骤将(26)转化为式(28)中间体。
或者，如流程XII所示，在约-10℃至约室温的温度下，用碱水(例如但不限于氢氧化钠)在有机溶剂(例如但不限于丙酮)中水解三氯乙酸中间体(26)，同时去除保护基(Pg为Fmoc)，获得式(29)中间体酸。可以通过在1-羟基苯并三唑的存在下，用活化试剂(例如但不限于N，N-二环己基碳二亚胺或1-乙基-3-(3-二甲基氨基-丙基)碳二亚胺盐酸盐)处理式(29)羧酸，接着在约-10℃至约室温的温度下，在疏质子溶剂(例如但不限于二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃)中，优选在Hünig’s碱或催化量4-(二甲基氨基)吡啶的存在下，使活化的中间体与式(3)适当取代的伯胺或仲胺反应，有效地实现所需的式(29)羧酸的酰胺化。随后，式(28)酰胺在流程IV条件下进行酰化，获得所需的式(I)化合物。
流程XII
其它文献中已知在肽合成中用于形成酰胺键的偶合试剂，也可以用于制备式(28)化合物。最终选择由式(29)中间体羧酸制备式(28)化合物所用的方法，是基于其与R1、R2和R3基团的相容性。
或者，流程XII的式(29)中间体酸，其中R1、R2和R3如前所述，可以通过下述方法获得。如流程XIII所示例，在无机碱(例如但不限于碳酸钾)或有机碱(例如但不限于N，N-二异丙基乙胺)存在下，式(6)三环二氮杂与过量的酰化剂(优选三氟乙酸酐或三氯乙酰氯)在疏质子溶剂(例如但不限于N，N-二甲基甲酰胺)中反应，然后，在约室温至溶剂回流温度的温度下，在质子有机溶剂(例如但不限于乙醇)中，优选用含水氢氧化钠将式(30)中间体双-三氟乙酰基(三氯乙酰基)中间体碱水解。
流程XIII
流程I式(I)化合物，其中Q为(a)，且R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、R9和R10如前所述，其优选的制备方法同样是用流程VII的式(17)酰化剂来酰化流程XII的中间体(28)，如流程XIV所示。接着用式(9)适当取代的芳基硼酸，其中T为B(OH)2，在例如但不限于二甲氧基乙烷和水或者乙腈和水的混合溶剂中偶合式(31)的中间体，其中K为Br或I，所述偶合在钯(0)催化剂，例如但不限于四(三苯基膦)钯(0)，或者钯(II)催化剂，例如但不限于[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]二氯钯(II)，以及例如但不限于碳酸钾或碳酸钠的碱的存在下，在约室温至回流的温度下进行，获得所需的式(I)化合物。
流程XIV
或者，流程I的优选式(I)化合物，其中Q为(a)，且R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、R9和R10如前所述，可以如流程XV所示来制备，用流程IX的式(20)酰化剂来酰化流程XII的式(28)中间体。
流程XV
或者，流程(I)的优选式(I)化合物，其中Q为(a)，且R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8、R9和R10如前所述，可以如流程XVI所示来制备，用流程V的式(7)酰化剂(其中J如前所述)来酰化流程XII的式(28)酰胺中间体。
流程XVI
制备流程XIV的式(31)酰胺中间体的优选方法如流程XVII所示。用式(17)酰化剂(其中K为Br或I)酰化式(6)的三环苯并二氮杂，获得式(34)中间体。式(34)中间体又与全卤代烷酰卤(优选三氯乙酰氯)在流程I的条件下反应，获得式(35)三氯乙酰中间体。然后，式(35)中间体与适当的伯胺或仲胺也在流程I的条件下反应，获得所需的式(31)产物。
流程XVII
生物学试验方法简述和结果的文本摘要 药理学 通过在下列试验方法中评估本发明代表性化合物，说明本发明化合物的FSH拮抗剂活性。
促卵泡激素受体依赖性CRE-荧光素酶报告基因分析用以 鉴定促卵泡激素(FSH)拮抗剂 本方法用来识别并测定人FSH受体拮抗剂的相对效价，使用可稳定产生人FSH受体的中国仓鼠卵巢细胞系和cAMP应答元件调控的荧光素酶报告基因。
原料和方法试剂 化合物载体将原料化合物以30mM溶于适当的载体中，优选磷酸盐缓冲液(PBS)或者二甲基亚砜(DMSO)。接着在DMSO中将所述化合物稀释为供2-剂量试验模式的1和20或30mM工作稀释物，和供剂量-效应模式的1μM至10mM工作稀释物。将DMSO稀释物在无菌培养基[D-MEM/F-12(GIBCO/BRL；Grand Island NY)中稀释500倍，该无菌培养基包含15mM HEPES、2mM 1-谷氨酰胺、维生素B6盐酸盐、苯酚红和5％FetalClone II(HyClone Laboratories，Inc；Logan，UT)、0.2％DMSO、100单位青霉素G/ml和100μg硫酸链霉素/毫升(GIBCO/BRL)。各化合物稀释物中的载体浓度都是一样的。
阳性对照购自Cortex Biochem，Inc.(San Leandro，CA)的纯化人FSH(＞98％)和得自Wyeth Research化合物库的已知的FSH-R噻唑烷酮拮抗剂。
细胞的制备 CHO FSH-R 6CRE-Luc细胞(1D7细胞)购自Affymax(Palo Alto，CA)。这些中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)被基因工程改造，以在6拷贝cAMP应答元件调控下稳定地表达重组人FSH受体基因和荧光素酶报告基因。在处理的前一天，将细胞放入96孔白色不透明的平板中，在培养基中的密度为50,000细胞/100μl/孔。在处理当天，通过抽吸从孔中除去培养基，并向每个孔加入50μl新鲜的培养基。将细胞在有5％CO2/95％空气的潮湿培养箱中在37℃下培养。
检测 在包含2X EC50纯化人FSH(0.8ng/ml)的培养基中，将试验化合物稀释至2X终浓度，加入孔中以得到终体积为100μl的包含0.25％(v/v)载体的培养基。处理的细胞在有5％CO2/95％空气的潮湿培养箱中37℃下培养4小时。在培养期终点，通过化学发光法，使用商业上可获得的试剂盒(LucScreen，Tropix，Inc.Bedfford，MA)，依照厂商的说明书来测量荧光素酶活性，只是在向每个孔加入100μl组合试剂之前，将缓冲液1和缓冲液2以相等比例混合在一起。使用发光计(EG & G Berthold Microlumat LB 96 P，Wallac，Gaithersburg，MD)检测化学发光，化学发光的测定为1秒/孔。
在加入LucScreen试剂之前，测量每个孔的本底发光。
实验组 在96-孔2-剂量的模式中，每种化合物的每个剂量重复检测2次。同样，每个平板上的对照重复检测2次，包括载体对照和3个阳性对照(在EC50的纯化人FSH存在下，EC50的phFSH(0.4ng/ml)、EC100的phFSH(1000ng/ml)和IC50的3-[(2S*，5R*)-5-{[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-甲基}-4-氧代-2-(5-苯基乙炔基-噻吩-2-基)-噻唑烷-3-基]-苯甲酰胺(2μM))。一个平板用来检测最多22种化合物。
在96-孔剂量-效应的模式中，在EC50的纯化人FSH存在下，每种化合物在6个剂量中的每个剂量下重复测定3次。用每种试验化合物对单独的纯化人FSH的EC50重复试验3次。每种化合物检测所选用的剂量是从初始的2-剂量筛选方法外推的。和试验化合物一起，纯化人FSH也在阳性对照和质量对照的剂量应答(0.03、0.1、0.3、1、3、10和30ng/ml)中检测。一个平板用于3种试验化合物和FSH阳性对照。
结果分析 荧光素酶活性以相对光单位/秒/孔表示。拮抗剂中的荧光素酶活性与适当的阴性和阳性对照比较。对于2-剂量试验，结果以荧光素酶活性报道，并表示成从EC50FSH所获得的效应的抑制％。对于剂量-效应试验，结果以IC50值报道。通过有适当加权和变换的单向方差分析和Biometrics(Wyeth Research，Princeton，NJ)确定的相关配对检验，对数据进行统计分析。用Biometrics开发的有适当加权和变换的Stat/Excel程序计算IC50值。
参考化合物 在2-剂量模式中，和剂量-效应模式中的EC50浓度纯化人FSH中，试验化合物与纯化人FSH和3-[(2S*，5R*)-5-{[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基甲酰基]-甲基}-4-氧代-2-(5-苯基乙炔基-噻吩-2-基)-噻唑烷-3-基]-苯甲酰胺的效果对比。
参考 1.Kelton，C.A.Cheng，S.V.Y.Nugent，N.P.Schweickhardt，R.L.Rosenthal，J.L.Overton，S.A.Wands，G.D.Kuzeja，J.B.Luchette，CA.和Chappel，S.C.(1992).The cloning of the human folliclestimulating hormone receptor and its expression in COS-7，CHO，and Y-1cells(人促卵泡激素受体的克隆及其在COS-7、CHO和Y-1细胞中的表达)，MoI.Cell.Endocrinol.89141-151。
2.Tilly，J.L.Aihara，T.Nishimori，K.Jia，X.-C，Billig，H.Kowalski，Kll Perlas，E.A.和Hsueh，A.J.W.(1992).Expression ofrecombinant human follicle-stimulating hormone receptorSpecies-specific ligand binding，signal transduction，and identification of multipleovarian messenger ribonucleic acid transcripts(重组人促卵泡激素受体的表达种属特异性配体结合、信号转导以及多重卵巢信使核糖核酸转录的鉴别)，Endocrinology 131799-806。
3.George，S.E.Bungay，P.J.和Naylor，LH.(1997).evalsuation of aCRE-directed luciferase reporter gene assay as an alternative tomeasuring cAMP accumulation(CRE-导向的荧光素酶报告基因检测评估作为测量cAMP积聚的供选方法)，J.Biomol.Screening 2235-240。
FSH受体激动剂和拮抗剂的体外生物检测 FSH受体激动剂和拮抗剂的选择性和依赖性 该检测用于验证发现抑制FSH-R-CRE荧光素酶驱动报告基因的标的(hits)的体外效价、功效、选择性和受体依赖性。
方法试剂 化合物载体原料化合物以30mM溶于100％DMSO(SigmaChemical Co.)。然后在用于生物测定之前，将化合物稀释于由含0.1％(w/v)BSA(Sigma)的Opti-MEMI(Life Technologies)组成的无菌测定培养基中。DMSO的测定终浓度为0.1％。
CHO-3D2细胞的制备 在试验前一天，将CHO-3D2细胞(hFSH-R)(1)放入96-孔的组织培养板(Falcon)中，密度为30,000细胞/孔，细胞处于补充有5％FetalClone II(Hyclone)、2mM L-谷氨酰胺(Life Technologies)和青霉素/链霉素(100U/ml，Life Technologies)的DMEM/F12培养基(LifeTechnologies)中。然后在37℃下，将平板细胞在潮湿的5％CO2/95％空气的大气中培养。
测定 在测定当天，细胞用100μl/孔的由含0.1％(w/v)BSA(Sigma)的Opti-MEMI(Life Technologies)组成的检测培养基洗涤三次。除去培养基，并向每个孔加入100μl的检测培养基。在37℃下将板再培养30分钟。然后除去培养基，在37℃下，存在或不存在试验化合物时，在50μl的包含载体、纯化人FSH(＞95％纯度；Cortex Biochem，Inc.San Leandro，CA)的检测培养基中攻击细胞30分钟。通过向各个孔中加入50μl的0.2N盐酸终止反应，通过放射免疫测定(RIA)用商业上可获得的试剂盒(Amersham)测量cAMP-积聚。
实验组 所有试验化合物都是用剂量-效应范例评价，范围从约0.01至30μM。在96-孔模式中，对照和试验化合物一式四份进行评价。用载体，EC20(1.85ng/mL为53pM)hFSH，或者化合物(存在或不存在EC20剂量的hFSH)处理细胞。用RIA评价化合物抑制因hFSH引起的cAMP-积聚的能力。
在每次检测中计算EC20浓度，只有那些EC20浓度等于1.85±0.4ng/mL的试验可作为有效的而被接受。在96-孔的模式中，第一栏包含阴性对照(检测培养基+0.1％DMSO)，第二栏包含阳性对照，EC20的hFSH+0.1％DMSO(1.85ng/mL或53pM)，然后是范围约0.03至30μM的6种浓度化合物，hFSH以其EC20浓度(1.85ng/mL或53pM)存在。
和试验化合物一起，FSH也作为激动剂模式中的阳性对照，使用的浓度范围为约0.1至1000ng/mL。
选择性研究 如上述CHO-3D2细胞一样，用CHO-25(hTSH-R)细胞对cAMP积聚进行测定，除下列不同将CHO-25细胞以密度50,000个细胞/孔置于平板内(2)。所有试验化合物以剂量-响应的模式进行评价，范围为0.01至30μM。对照和试验化合物一式四份进行评价。用载体、EC20浓度的hTSH(5nM；hTSH＞98％纯度，Cortex Biochem，Inc.)，或者化合物(存在或不存在EC20浓度的hTSH)处理细胞。用RIA评价化合物抑制由hFSH引起的cAMP-积聚的能力。
和试验化合物一起，hTSH也作为激动剂模式中的阳性对照，使用的浓度范围为0.01μM至1000μM。
非受体介导的响应 如上述CHO-3D2细胞一样，用CHO-K1(亲代细胞系)细胞对cAMP积聚进行测定。所有试验化合物以剂量-响应的模式进行评价，范围为约0.01至30μM。对照和试验化合物一式四份进行评价。用载体、5μM forskolin(其引起由EC20浓度hFSH引起的相等fmol/ml浓度的cAMP-积聚(5μM forskolin，Sigma Chemical Co；先前在生物检测鉴定期间计算))，或者化合物(存在或不存在5μM forskolin)处理细胞。用RIA评价化合物抑制由forskolin引起的cAMP-积聚的能力。
和试验化合物一起，forskolin也作为激动剂模式中的阳性对照，使用的浓度范围为0.01μM至1000μM。
结果分析 cAMP积聚以fmol/ml表示。激动剂模式中的cAMP积聚，或者拮抗剂模式中化合物抑制hFSH、hTSH或forskolin引起的cAMP积聚的能力，与适当的阴性和阳性对照对比。用单向方差分析来分析数据，用最小显著差试验(Least Significant Difference test)测定处理和对照之间的显著性差异。
参考化合物 试验化合物与纯化人FSH的效果对比，在范例中，hFSH引起cAMP积聚的浓度-依赖性增加，表观EC80＝22.55ng/ml、EC50＝6.03ng/ml和EC20＝1.85ng/ml，用四参数逻辑计算方程计算。用hFSH和forskolin进行相同的比较。
生物活性 基于标准药理试验方法所获得的结果，本发明化合物显示，可以体外阻碍FSH的细胞功能，包括大鼠卵巢粒细胞中第二信使cAMP和雌二醇的生成。我们发现本发明代表性化合物可以选择性地与FSH受体相互作用，但不拮抗FSH与其受体的结合(表1)。
因此，本发明化合物可以用作女性避孕剂。
表1 实施例 实施例1 2，2，2-三氯-1-{10-[(2′-甲氧基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮 用超过5分钟的时间，将三氯乙酰氯(2.63毫升，23.6毫摩尔)逐滴加到(2′-甲氧基-联苯基-4-基)-(5H，11H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-10-基)-甲酮(3.0克，7.60毫摩尔)和N，N-二异丙基乙胺(2.65毫升，15.2毫摩尔)的二氯甲烷(60毫升)溶液中。氮气下室温搅拌该反应过夜，然后用水猝灭。有机层用0.1N盐酸和水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩成油状物。该油状物经硅胶Merck-60闪色谱法纯化，洗脱剂为0至5％梯度乙酸乙酯/二氯甲烷，获得黄色泡沫的标题化合物(2.34克)。
MS[(+)ESI，m/z]539[M+H]+。
C28H21Cl3N2O3+0.2 C4H8O2的分析计算值C 62.05，H 4.09，N5.03。实测值C 62.28，H 4.47，N 4.86。
实施例2 10-[(2′-甲氧基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-N-[(1-甲基-1H-吡咯-2-基)甲基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-甲酰胺 向实施例1的2，2，2-三氯-1-{10-[(2′-甲氧基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮(1.175克，2.17毫摩尔)的乙腈(15毫升)悬浮液中，加入(1-甲基-1H-吡咯-2-基)甲胺(0.263克，2.38毫摩尔)，接着加入二甲基亚砜(0.710克，9.06毫摩尔)和三乙胺(0.400克，4毫摩尔)。氮气下于80℃加热该混合物4小时。真空除去溶剂，残余物经硅胶Merck-60闪色谱法纯化，0-25％乙酸乙酯/二氯甲烷梯度洗脱，产生黄色泡沫，用乙酸乙酯和己烷处理后获得固体(0.464克)，熔点mp148-150℃。
MS[(+)ESI，m/z]53116[M+H]+。
C33H30N4O3的分析计算值C 74.70，H 5.70，N 10.56。实测值C74.56，H 6.15，N 10.20。
实施例3 2，2，2-三氯-1-{10-[(2，2′，6′-三甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮 步骤A.2，2′，6′-三甲基-联苯基-4-羧酸甲酯 将2，6-二甲基硼酸(13.7克，91毫摩尔)和3-甲基苯甲酸甲酯(20.9克，91毫摩尔)溶于甲苯(425毫升)中。然后加入乙醇(250毫升)和水(250毫升)，再加入碳酸钠(38.7克，365毫摩尔)。该系统用氮气吹扫后，加入四(三苯基膦)钯(0)催化剂(10.5克，9毫摩尔)。氮气下加热该混合物21小时，并通过C盐过滤。用大量乙酸乙酯洗涤滤饼，合并的滤液用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥后浓缩得到固体。残余物经硅胶Merck-60闪色谱法纯化，0-20％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱，获得白色固体的标题化合物(19.2克，83％)。
C17H18O2的分析计算值C 80.28，H 7.13。实测值C 80.37，H7.21。
步骤B.2，2′，6′-三甲基-联苯基-4-羧酸 用1N氢氧化钠(250毫升)处理步骤A的2，2′，6′-三甲基-联苯基-4-羧酸甲酯(18.5克，75.4毫摩尔)的四氢呋喃溶液，并于90℃加热20小时。用浓盐酸将该混合物酸化至pH～1，用二氯甲烷萃取，经无水硫酸镁干燥，并浓缩获得白色粉末的标题化合物(15.63克)。从水性乙醇中重结晶，获得白色片状物，熔点m.p.172-173℃。
MS[(-)ES，m/z]239.1[M-H]-。
C16H16O2的分析计算值C 79.97，H 6.71。实测值C 79.71，H6.70。
步骤C.(5H，10)-[(2，2′，6′-三甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂 用35毫升(479毫摩尔)亚硫酰氯搅拌步骤B的2，2′，6′-三甲基-联苯基-4-羧酸(11.4克，47.4毫摩尔)，并加热至70℃3小时。借助于甲苯真空除去过量的亚硫酰氯。将粗的酰基氯溶于二氯甲烷(100毫升)中，并将10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂(12.23克，47.4毫摩尔)的二氯甲烷(50毫升)溶液逐滴加入。室温下搅拌过夜后，该混合物用水、1N盐酸、饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤后浓缩。残余物经硅胶Merck-60闪色谱法纯化，1∶1至4∶1二氯甲烷/己烷梯度洗脱，获得纯的标题化合物，从乙醇水溶液中重结晶，得到细的半透明的片状物，熔点m.p.170-171℃。
MS[(+)ESI，m/z]407.2[M+H]+。
C28H26N2O·0.15H2O的分析计算值C 82.18，H 6.48，N 6.85。实测值C 82，28，H 6.32，N 6.76。
步骤D.2，2，2-三氯-1-{10-[(2，2′，6′-三甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮0.15水 向步骤C的(5H，10)-[(2，2′，6′-三甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂(7.934克，19.5毫摩尔)的二氯甲烷(160毫升)溶液中，加入三氯乙酰氯(11克，60.5毫摩尔，3.1eq.)、N，N-二异丙基乙胺(5.54克，43毫摩尔，2.2eq.)和4-(二甲氨基)吡啶(10摩尔％)。室温下搅拌该混合物16.5小时，然后用水(100毫升)猝灭，并搅拌1小时。有机层用0.1N盐酸和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，并浓缩得到黄色泡沫。
MS[(+)ES，m/z]551.1[M+H]+。
C30H25Cl3N2O2·H2O的分析计算值C 64.97，H 4.60，N 5.05。实测值C64.79，H 4.97，N 4.58。
实施例4 N-[(5-甲基异唑-3-基)甲基]-10-[(2，2′，6′-三甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-甲酰胺 依照实施例2的方法制备标题化合物。从实施例3的2，2，2-三氯-1-{10-[(2，2′，6′-三甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮(1.8克，3.26毫摩尔)、(5-甲基-3-异唑基)甲胺(0.305克，2.7毫摩尔)、二甲基亚砜(1.06克，13.6毫摩尔)和三乙胺(0.605克，6毫摩尔)的乙腈(20毫升)溶液开始。残余物经硅胶Merck-60闪色谱法纯化，0-35％乙酸乙酯/二氯甲烷梯度洗脱，获得橘黄色泡沫。从乙酸乙酯/二氯甲烷/己烷中重结晶，得到白色粉末(0.334克)，熔点m.p.233-234℃。
MS[(+)ESI，m/z]545.2[M+H]+。
C34H32N4O3·0.15C5H10O2的分析计算值C 74.49，H 6.00，N10.04。实测值C 74.46，H 6.11，N 10.06。
实施例5 10-[(2′-甲氧基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-N-[(5-甲基异唑-3-基)甲基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-甲酰胺 依照实施例2的方法制备标题化合物。从实施例1的2，2，2-三氯-1-{10-[(2′-甲氧基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮(1.483克，2.75毫摩尔)、(5-甲基-3-异唑基)甲胺(0.256克，1.0eq.)、二甲基亚砜(5.0eq.0.896克，11.45毫摩尔)和三乙胺(2.2eq.0.510克，5毫摩尔)的乙腈(20毫升)溶液开始。残余物经硅胶Merck-60闪色谱法纯化，0-20％乙酸乙酯/二氯甲烷梯度洗脱，获得泡沫(0.460克)，用乙酸乙酯/己烷处理后得到类白色固体，熔点m.p.111-113℃。
MS[(+)ESI，m/z]533.12[M+H]+。
C32H28N4O4的分析计算值C 72.17，H 5.30，N 10.52。实测值C 71.85，H 5.27，N 10.25。
实施例6 N-[(2，5-二甲基-3-呋喃基)甲基]-10-[(2′-甲氧基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-甲酰胺 依照实施例2的方法制备标题化合物。从2，5-二甲基-3-呋喃基甲胺(0.264克，2.1毫摩尔)、实施例1的2，2，2-三氯-1-{10-[(2′-甲氧基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮(1.138克，2.1毫摩尔)、三乙胺(0.470克，2.2eq.4.6毫摩尔)和二甲基亚砜(1.1克，5.0eq.10.5毫摩尔)的乙腈(20毫升)溶液开始。残余物经硅胶Merck-60闪色谱法纯化，30-45％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱，得到白色粉末(0.453克)。通过制备HPLC进一步纯化，色谱柱Primesphere C18(2×25厘米)，流动相68％乙腈/含三氟乙酸的水，100毫升/分钟，254纳米检测。纯的馏份用氢氧化铵中和后蒸发，得到无定型固体(0.153克)。
MS[(+)ESI，m/z]546.2[M+H]+。
MS[(-)ESI，m/z]544.2[M-H]-。
实施例7 N-[(4-苯甲基吗啉-2-基)甲基]-10-[(2′-甲氧基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-甲酰胺 依照实施例2的方法制备标题化合物。从实施例1的2，2，2-三氯-1-{10-[(2′-甲氧基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮(0.619克，1.15毫摩尔)、(4-苯甲基-1，4-嗪-2-基)-甲胺(01.97克，0.955毫摩尔)、二甲基亚砜(0.374克，4.8毫摩尔)和三乙胺(0.213克，2.1毫摩尔)的乙腈(15毫升)溶液开始。残余物吸附在硅胶Merck-60上，经闪色谱法(0-75％乙酸乙酯/二氯甲烷)纯化，获得类白色固体(0.241克)，熔点m.p.180-182℃。
MS[(+)ESI，m/z]627.19[M+H]+。
C39H38N4O4·0.35C5H10O2的分析计算值C 73.79，H 6.25，N 8.52。实测值C 73.62，H 6.07，N 8.55。
实施例8 N-[(1-甲基-1H-吡咯-2-基)甲基]-10-[(2，2′，6′-三甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-甲酰胺 依照实施例2的方法制备标题化合物。从实施例3的2，2，2-三氯-1-{10-[(2，2′，6′-三甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮(1.4克，2.5毫摩尔)、(1-甲基-1H-吡咯-2-基)甲胺(0.234克，2.1毫摩尔)、二甲基亚砜(0.822克，10.5毫摩尔)和三乙胺(0.470克，4.6毫摩尔)的乙腈(15毫升)溶液开始。残余物经硅胶Merck-60闪色谱法(0-25％乙酸乙酯/二氯甲烷)纯化，得到泡沫(0.924克)，用乙酸乙酯/己烷/二氯甲烷处理后得到固体，熔点m.p.222-224℃。
MS[(+)ESI，m/z]543.3[M+H]+；[(-)ESI，m/z]541.3[M-H]-。
实施例9 2，2，2-三氯-1-{10-[(2，2′-二甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮 步骤A.2，2′-二甲基-1，1′-联苯基-4-羧酸甲基酯 将4-溴-3-甲基苯甲酸甲酯(25.0克，110毫摩尔)、o-甲苯基硼酸(16.5克，120毫摩尔)和碳酸钾(50克，360毫摩尔)在二烷∶水(300毫升∶200毫升)中的混合物，吹扫氮气1小时。加入[1，1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯钯(II)(4.5克，5.5毫摩尔)，将该反应混合物在剧烈搅拌下于100℃加热3.5小时。冷却的反应混合物经C盐过滤，滤饼用乙酸乙酯(500毫升)洗涤。合并的有机相用1M氢氧化钠水溶液(500毫升)和盐水(500毫升)洗涤，经无水碳酸钾干燥，过滤后真空浓缩，得到深色油(28.6克)。经闪色谱法纯化，2％乙酸乙酯/己烷为溶剂，得到浅黄色油状的标题化合物(24.7克)。
HRMS.C16H17O2的计算值241.12231。实测值[(+)ESI，m/z]24 1.12205。
C16H16O2的分析计算值C 79.97，H 6.71。实测值C 79.67，H6.61。
步骤B.2，2′-二甲基-联苯基-4-羧酸 向步骤A的2，2′-二甲基-1，1′-联苯基-4-羧酸甲酯(24.7克，103毫摩尔)的5∶1四氢呋喃甲醇(200毫升)溶液中，加入1M氢氧化钠水溶液(108毫升，108毫摩尔)。在回流温度加热该反应混合物1小时，冷却后真空浓缩，除去有机溶剂。将所得水溶液冷却至0℃，并向其中缓慢加入2M盐酸水溶液(60毫升，120毫摩尔)，再加入水(60毫升)以便于搅拌沉淀出来的产物。于0℃搅拌该悬浮液1小时，然后过滤，得到白色固体的标题化合物(22.6克)，熔点m.p.140-143℃。
MS[(+)ESI，m/z]225[M-H]-。
步骤C.(10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-10-基)-(2，2′-二甲基-联苯基-4-基)-甲酮 于室温氮气下，向步骤B的2，2′-二甲基-1，1′-联苯基-4-羧酸(22.4克，99.0毫摩尔)的无水二氯甲烷(500毫升)悬浮液中，加入无水N，N-二甲基甲酰胺(5毫升)，再逐滴加入2.0M乙二酰氯的二氯甲烷(60毫升，120毫摩尔)溶液，室温下搅拌该反应混合物2小时，然后真空浓缩，将残余物重新溶于无水二氯甲烷(200毫升)中。真空浓缩该溶液，得到棕色油状的粗的酰基氯。将酰基氯溶于二氯甲烷(500毫升)中，加入10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂(21.9克，119毫摩尔)，再加入N，N-二异丙基乙胺(87毫升，500毫摩尔)，氮气下于室温搅拌该反应混合物16小时。然后该反应混合物用1M盐酸水溶液(5×1升)、10％氢氧化钠水溶液(1升)和盐水(500毫升)洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤后真空浓缩，得到深色泡沫。经闪色谱法纯化，用2.5-40％乙酸乙酯/己烷的溶剂梯度洗脱，得到褐色固体，从乙酸乙酯/己烷中重结晶，得到浅橘黄色固体的标题化合物(12.4克)。母液经闪色谱法纯化，又得到白色固体的标题化合物(11.5克)，熔点m.p.145-148℃。
MS[(+)ESI，m/z]393[M+H]+。
C27H24N2O的分析计算值C 82.62，H 6.16，N 7.14。实测值C82.26，H 5.83，N 6.50。
步骤D.2，2，2-三氯-1-{10-[(2，2′-二甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮 在～5℃下，向步骤C的(10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-10-基)-(2，2′-二甲基-联苯基-4-基)-甲酮(8.38毫摩尔)和三乙胺(16.76毫摩尔)的二氯甲烷(30毫升)溶液中，快速滴加三氯乙酰氯(25毫摩尔)。搅拌该混合物并升温至室温过夜。该混合物用0.1N盐酸和稀盐水洗涤，然后经无水硫酸钠干燥并蒸发，剩下浅绿色的油。该化合物经Merck硅胶-60塞过滤(用二氯甲烷洗脱)纯化，然后用热的乙酸乙酯/己烷(3/1)处理，获得淡黄色结晶固体，熔点m.p.212-214℃。
MS[(+)ESI，m/z]537[M+H]+。
C29H23Cl3N2O2的分析计算值C 64.76，H 4.31，N 5.21。实测值C 64.70，H 4.35，N 4.96。
实施例10 10-[(2，2′-二甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-N-{[5-(4-甲氧基苯基)-1，2，4-二唑-3-基]甲基}-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-甲酰胺 步骤A.[5-(4-甲氧基苯基)-1，2，4-二唑-3-基]甲胺 向3-氯甲基-5-(4-甲氧基-苯基)-[1，2，4]二唑(8.90毫摩尔)的N，N-二甲基甲酰胺(10毫升)溶液中，加入叠氮化钠(17.8毫摩尔)。室温下搅拌该混合物20小时。将反应混合物倾入水(30毫升)中，并用二氯甲烷(3×)萃取。合并有机萃取物，用水洗涤(2×)，经无水硫酸钠干燥并蒸发。然后将澄清的油状残余物放置高真空下，并逐渐加温18小时。冷却后，该物质固化。将该固体溶于四氢呋喃(15毫升)中，并用三苯基膦(9.0毫摩尔)处理。立即可见明显起泡。搅拌该混合物16小时，然后用水(3.0毫升)处理。该混合物在45℃油浴中加热3小时。产物经闪色谱法(硅胶；2∶1醚/二氯甲烷)纯化，熔点m.p.66-68℃。
MS[(+)ESI，m/z]206[M+H]+。
C10H11N3O2的分析计算值C 58.53，H 5.40，N 20.48。实测值C 58.5，H 5.38，N 20.59。
步骤B.10-[(2，2′-二甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-N-{[5-(4-甲氧基苯基)-1，2，4-二唑-3-基]甲基}-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-甲酰胺 将实施例9的2，2，2-三氯-1-{10-[(2，2′-二甲基-1，1′-联苯基-4-基)羰基]-10，11-二氢-5H-吡咯并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-3-基}乙酮(0.26毫摩尔)、二甲基亚砜(100微升)和步骤A的[5-(4-甲氧基苯基)-1，2，4-二唑-3-基]甲胺(0.546毫摩尔)在乙腈(2.
