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杯[n]咔唑类衍生物及其作为T交叉DNA荧光分子探针的应用的制作方法

作者:NG体育 发布时间:2024-06-07 09:13:36 次浏览

背景技术:
受到尺寸大小等结构因素的限制,传统的苯酚骨架的杯芳烃与体积较大的离子、生物大分子匹配程度不高。鉴于大环主体分子在超分子化学中的重要意义,新型大环化合物的创制已经得到越来越多的关注。构筑新型大环主体分子,并将其应用于离子检测、环境检测、药物传递、疾病的早期诊断和治疗等领域,具有重要的意义。
dna在复制和转录的过程中,会出现局部的解链,产生变型。这种变型会导致一种称为超螺旋的、不寻常的dna结构形成(如支链dna连接体,三链体和四链体dna等)。这种超螺旋的结构会阻碍dna的正常转运。近年来,四链体dna引起了化学家和生物学家的足够关注,但对于支链dna连接体(t交叉dna,threewayjunction,twj)的研究还不够深入。在dna中,twj产生于噬菌体的重组和复制后随链的过程中。更进一步,在腺病毒末端反向重复中能够观察到twj的结构。它参与病毒dna的复制和将病毒dna与宿主基因组结合。根据这种结合特点,能使病毒开发为基因治疗载体。通过外加的药物来稳定t交叉dna的结构,可能会阻止dna正常的酶反应进程,从而引起基因组的不稳定性,达到抑制dna复制的目的。
杯咔唑类衍生物在与t交叉dna结合前后荧光的明显差异,提高了检测的灵敏度,这种荧光探针染料由于其标记速度快、生理ph条件、对生物分子的功能活性影响小。
技术实现要素:
本发明的目的是改进杯[n]咔唑衍生物的结构、优化其制备方法并提高其响应的灵敏度。本发明不改变杯咔唑的母体结构,在咔唑2,7位,以及9位n原子上引入不同的取代基,制备了一系列衍生结构,增大了探针与t交叉dna的结合能力,所检测核酸的极限浓度为275nm。表明杯咔唑衍生物可作为一种定量检测t交叉dna的高灵敏探针。
本发明所述的杯[n]咔唑衍生物,其化学结构通式为:
r2=-h,c1~c4的烷基或烷氧基,卤素
进一步地,本发明所述的杯[n]咔唑衍生物选自:
本发明还提供了所述的杯[n]咔唑衍生物的制备方法,包括以下步骤:
(1)在四氢呋喃(thf),n,n-二甲基甲酰胺(dmf)或n,n-二甲基亚砜(dmso)等溶剂中,向r1含有酯基的化合物中加入5~30倍量(摩尔比)的n,n-二甲基乙二胺,25~90℃加热5~24小时,制备r1含有烷氨基侧链的化合物;
(2)加入四氢呋喃,n,n-二甲基甲酰胺,n,n-二甲基亚砜等溶剂使化合物溶解,加入3~10倍量碘甲烷,25~60℃加热3~10小时制备r1含有季胺盐侧链的化合物。
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