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背景技术：
2.塞来昔布(celecoxib)为特异性cox
‑
2抑制剂，一直炎性前列腺素类物质的产生，具有抗炎，镇痛和退热作用。与传统非甾体抗炎药(nsaids)相比，塞来昔布能够选择性抑制cox
‑
2环氧化酶，而不会抑制与胃肠道保护作用相关的cox
‑
1的表达，所产生的不良反应较低。目前在临床主要用于急性创伤、术后疼痛。
3.但塞来昔布在水中的溶解度仅有5
‑
7μg/ml，在生物药剂学分类中处于classⅱ低溶解高渗透药物；此外塞来昔布还有容易粘结，低压缩率的特点，使得其制剂性能较差。口服后使得药物无法达到在胃肠管中完全润湿并溶解，抑制了该药物的进一步吸收。目前国内塞来昔布的临床使用剂型主要为胶囊剂，但胶囊剂生物利用度低，给药剂量大，吸收缓慢的缺点。为了更好缓解患者病痛，最好能够被患者快速吸收，产生镇痛效果。
4.采用环糊精或其衍生物对难溶药物进行包合，是现代难溶性药物增溶的一种广为应用的方式。常见的环糊精包括磺丁基倍他环糊精(sbe
‑
β
‑
cd)，羟丙基倍他环糊精(hp
‑
β
‑
cd)。有文献报道，sbe
‑
β
‑
cd相比于hp
‑
β
‑
cd，具有肾毒性小，溶血作用小的优点，并且具有更好的包合能力。但是sbe
‑
β
‑
cd和药物的包合物稳定性还有待加强，长期放置的稳定性对临床实际使用具有很重要的影响。其和有效活性成分，杂质含量，生物利用度息息相关。
5.cn108992676a公开了一种以金属有机框架物为载体的塞来昔布固体分散体，所述有机框架有α
‑
环糊精和钾离子，钠离子。是以mofs作为药物载体，能够迅速溶解。但是其由于mofs的特性，其在空气中长久放置可能会存在稳定性不足的情况。
6.cn103405782a公开了一种含塞来昔布的包合物，包和材料为β
‑
环糊精，羟丙基
‑
β
‑
环糊精。cn103211825a公开了一种塞来昔布组合物，其是塞来昔布和环糊精衍生物的包合物。
7.陈荣震等人(“塞来昔布包合物物的制备及其在大鼠体内的药动学”，《中国医药工业杂志》，2013，44(5)，475
‑
478)研究塞来昔布和β
‑
环糊精包合物及其药代动力学的数据，发现所得包合物血药浓度和生物利用度提高，口服吸收明显改善。史红霞等人（一种提高塞来昔布溶解度的制备方法，《黑龙江医药科学》，2016年2月第39卷第1期）也报道了将α
‑
环糊精，β
‑
环糊精，羟丙基
‑
β
‑
环糊精，甲基
‑
β
‑
环糊精按照不同配比的环糊精混合物和塞来昔布制备为不同配方的包合物，研究溶解度和体外溶出的数据。
8.上述现有技术采用各类环糊精的衍生物和塞来昔布一起制作为溶解性改善的包合物，塞来昔布溶解度得到了提高，但是药剂稳定性的问题仍未得到解决。
技术实现要素：
9.为克服现有技术中塞来昔布包合物稳定性不好的缺陷，本发明提供了一种塞来昔布与内酯改性磺丁基倍他环糊精钠的包合物及其制备方法。
10.本发明第一个目的是提供一种塞来昔布与内酯改性磺丁基倍他环糊精钠的包合物，其为塞来昔布和4
‑
甲基丁内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠的包合物，所述4
‑
甲基丁内酯改性磺丁基倍他环糊精钠具有如下的结构简式：，其中代表磺丁基倍他环糊精钠，n为3
‑
15的整数。
11.环糊精是一大类要药用辅料，经常用于包合不溶性的药物以改善药物制剂的溶解性能。发明人经过大量实验研究发现，采用磺丁基倍他环糊精钠(sbe
‑
β
‑
cd
‑
na)对塞来昔布进行包合，其安全性好、包合率高，能够复配制备为适用于口服的剂型，比如口服冻干粉，混悬剂，溶液剂。磺丁基倍他环糊精钠是阴离子型高水溶性环糊精衍生物，能够很好的与难溶性药物包合形成非共价复合物，提高药物稳定性、水溶性、安全性、降低肾毒性、缓和药物溶血性、控制药物释放速率的优点；但是发现得到的包合物稳定性还有所欠缺，特别是在较高湿度环境下放置一段时间后，有效成分塞来昔布纯度有所下降，而且小鼠的动物学实验表明较高湿度环境下放置一段时间后，再对小鼠灌胃给药，生物利用度有所下降。磺丁基倍他环糊精钠还有一些表面的羟基没有反应，特别是6位的伯羟基，反应活性比2位和3位的仲羟基反应活性高，方便进行醚化、酯化、氧化、交联等化学改性方式。发明人预料不到地发现使用4
‑
甲基丁内酯(γ
‑
戊内酯 )对磺丁基倍他环糊精钠进行改性后，再对塞来昔布包合，所得包合物增溶性仍然优异，但稳定性有明显的提升。而申请人同样以γ
‑
丁内酯，β
‑
丁内酯，δ
‑
戊内酯，ε
‑
己内酯对磺丁基倍他环糊精钠进行改性，但是与塞来昔布包合物的稳定性并没有明显提升。
12.现有技术中采用内酯开环聚合对环糊精进行改性有报道，比如.文献1 j. am. chem. soc. 2004, 126, 42, 13588
–
13589；
文献2 phys. chem. b 2016, 120, 29, 7174
–
7181；文献3 macromolecules 2007, 40, 9, 3154
–
3158；文献4 polymer chemistry 2012,3,1119
‑
1122。
13.未发现有文献报道4
‑
甲基丁内酯改性后的磺丁基倍他环糊精对药物除了增溶，能够起改善稳定作用。虽然原因未明，但申请人意外地发现磺丁基倍他环糊精钠表面羟基引发4
‑
甲基
‑
丁内酯开环聚合后得到的内酯改性磺丁基倍他环糊精钠，和塞来昔布一起制备为包合物，虽然包封率、增溶倍数有少许下降，但是稳定性得到了明显改善，这对于实际药物的生产，贮存，使用具有极大的优势，因此虽然包封率、增溶倍数性能有所下降，但仍在令人满意的程度，而同时稳定性得到大幅提升，更有利于塞来昔布的开发和临床的使用。
14.发明人发现，直接以β
‑
环糊精作为反应底物和内酯较难得到内酯开环聚合物的改性产物。原因可能是一方面β
‑
环糊精的溶解度不够，还有一方面原因是β
‑
环糊精羟基之间的氢键作用力很强，阻止了催化剂和羟基的配位，进而通过羟基引发内酯的开环聚合的效率不高。而磺丁基倍他环糊精的部分羟基已经被反应，剩余一定数量的伯羟基可以进行表面改性，同时磺丁基倍他环糊精的溶解性良好，作为反应底物和内酯在较温和的条件下发生开环聚合的反应得到改性的环糊精。
15.所述4
‑
甲基
‑
丁内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠通过包括以下步骤的制备方法得到：惰性气氛下，将磺丁基倍他环糊精钠，4
‑
甲基丁内酯，催化剂投入到有机溶剂中混匀，回流条件下反应，冷却后反应液倾入不良溶剂中，析出沉淀，重结晶，最终得到4
‑
甲基
‑
丁内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠，为白色结晶。所述惰性气氛优选为氩气气氛；所述不良溶剂为冰乙醚。
16.所述有机溶剂沸点高于反应温度，比如dmf，甲苯等。有机溶剂使用前用作无水处理，比如使用氢化钠。
17.进一步地，所述加热回流反应在100
‑
120℃反应24
‑
48h，重结晶是用水溶解后，投入到无水乙醇和/或丙酮中进行重结晶。
18.进一步地，所述催化剂选自有机锡化合物，比如辛酸亚锡，二月桂酸二丁基锡，二月桂酸二辛基锡。
19.进一步地，磺丁基倍他环糊精钠，4
‑
甲基丁内酯，催化剂的物质的量比为1：15
‑
30：0.001
‑
0.01。
20.进一步地，所述4
‑
甲基丁内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠的分子量为2500
‑
5000。
21.在本发明一个优选技术方案中，所述塞来昔布和4
‑
甲基丁内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠摩尔比为1：1
‑
2，优选为1：1.3
‑
1.5。在上述比例范围内，所得包合物的包封率，增溶性和稳定性的综合性能达到最优。
22.本发明还提供了一种塞来昔布口服溶液剂，包括以下质量份的组分：100份塞来昔布和4
‑
甲基丁内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠的包合物，20
‑
30份增溶剂，3
‑
6份抗氧剂，500
‑
700份注射用水，70
‑
100份醇溶剂。
23.进一步地，所述抗氧剂包括对氨基苯酚，维生素c，l
‑
赖氨酸，焦亚硫酸钠中的至少一种；所述增溶剂选自吐温80，吐温60，十二烷基硫酸钠，油酸钠，中链甘油三酯中的至少一种；所述醇溶液选自甘油乙醇，丙二醇中的至少一种。
24.本发明相取得了以下有益效果：
通过对磺丁基倍他环糊精钠进行4
‑
甲基
‑
丁内酯开环聚合的改性，得到了内酯接枝改性的磺丁基倍他环糊精钠，和塞来昔布制备为包合物后，稳定性有明显的改善，更有利于塞来昔布新的药剂形式的开发。
具体实施方式
25.磺丁基倍他环糊精钠采购自西安德立生物化工有限公司，平均取代度约为4.3；塞来昔布原料药采购自河南东泰制药有限公司，纯度99.9%；本发明实施例中所述“份”若无特别说明，均为质量份，所述%若无特别说明，均指质量百分比。
26.制备例1在氮气气氛下，向含有无水处理的dmf溶剂的反应器投入磺丁基倍他环糊精钠、4
‑
甲基丁内酯、辛酸亚锡；其中磺丁基倍他环糊精钠，4
‑
甲基丁内酯、辛酸亚锡的摩尔比为1：20：0.005，升温至110℃，回流搅拌条件下反应24h，冷却至室温，反应液直接倾入冰乙醚中，析出沉淀，沉淀用水溶解，无水乙醇重结晶，重结晶2次，获得白色结晶，为产品4
‑
甲基丁内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠。经过gpc分子量测试，重分子量约为3620，pdi=1.31，内酯开环聚合后的平均聚合度n约为5.8，以下称为改性环糊精1。
27.制备例2其他条件和制备例1相同，区别在于磺丁基倍他环糊精钠、4
‑
甲基丁内酯的摩尔比为1:15。经过gpc分子量测试，所得产物重均分子量约为2850，pdi=1.28，内酯开环聚合后的平均聚合度n约为2.7，以下称为改性环糊精2。
28.制备例3其他条件和制备例1相同，区别在于磺丁基倍他环糊精钠、4
‑
甲基丁内酯的摩尔比为1:30。经过gpc分子量测试，所得产物重均分子量约为4360，pdi=1.33，内酯开环聚合后的平均聚合度n约为8.3，以下称为改性环糊精3。
29.实施例1在40
‑
45℃范围内，将一定量的塞来昔布溶于乙醇中，保持40
‑
45℃，加入不同摩尔比例的制备例1制得的改性环糊精1的饱和水溶液，搅拌1h，冷却至室温，得到白色混悬物，津腾0.22μm pes滤器过滤，过滤后在0.01mpa，70℃下真空干燥即得。对所得包合物的增溶度，以及稳定性进行测试。
30.增溶度是称取一定量制备得到的包合物在常温条件下超声分散溶解1h，所得饱和溶液经过过滤后，在容量瓶中准确稀释100倍，hlpc测试浓度。未经过包合的塞来昔布在水中包合溶解度仅为0.94μg/ml，和文献记载接近。
31.稳定性是将制备得到包合物统一配制为以塞来昔布计的10μg/ml的水溶液，经过冻融循环5次后，以塞来昔布hplc特征峰面积的保留率来评价稳定性。所述冻融循环是样品在
‑
15℃放置2天，恢复常温后，再在40℃，60rh%环境下放置2天，如此重复5次冻融试验。
32.特征峰保留率=保存30天后特征峰面积/塞来昔布10μg/ml水溶液中特征峰面积
×
100%。
33.配方如下表1所示：
从表1数据可以看出，随着环糊精用量增加，包合率一直呈上升趋势，塞来昔布和改性环糊精1的摩尔比为1:1.4时，增溶度在达到最大，此时继续增加环糊精用量，增溶度反而下降。因此以塞来昔布和改性环糊精的摩尔比为1:1.2
‑
1.5为最佳比例。
34.在相同的条件下测试塞来昔布和未改性的磺丁基倍他环糊精钠，在不同摩尔比下的包合率，增溶度以及稳定性的评价，结果如下表2所示：通过表1和表2数据的比较，可以看出采用本发明的4
‑
甲基丁内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠对塞来昔布进行包合后，其同样能增加溶解度，虽然相比于未改性的磺丁基倍他环糊精钠，增溶度有所下降，但是稳定性却得到了明显提升。这对于实际药物的生产，贮存，使用具有极大的优势，特别是对于直接口服的溶液剂型。这种对塞来昔布包合物稳定性提升的现象，在其他内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠未曾发现，而申请人同样以γ
‑
丁内
酯，β
‑
丁内酯，δ
‑
戊内酯对磺丁基倍他环糊精钠进行改性，之后和塞来昔布制备为包合物，其增溶性有不同程度的提高，但稳定性都未有明显改善，和未改性的磺丁基倍他环糊精钠接近。ε
‑
己内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠，对塞来昔布包合物稳定性有一定提升，但其增溶度不够理想，最大只能达到9.53μg/ml。申请人推测，4
‑
甲基丁内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠和塞来昔布包合物由于特殊的接枝空间位阻，其能够在不显著影响溶解度的同时，改善了稳定性。
35.在相同条件下，以制备例2和制备例3得到的改性环糊精分别和塞来昔布制备为包合物，对其增溶度和稳定性进行测试，结果分别如下表3和表4所示：合物，对其增溶度和稳定性进行测试，结果分别如下表3和表4所示：从表1，表3，表4的数据可以看出，以制备例1的改性环糊精1和塞来昔布制得的包合物，在溶解度改善和稳定性改善能够取得最优平衡。说明4
‑
甲基丁内酯开环聚合的得到的支链长度对包合物性能有所影响。
36.实施例2将100份塞来昔布和4
‑
甲基丁内酯改性磺丁基倍他环糊精钠的包合物1
‑
4，25份吐温80，4.2份对氨基苯酚加入到500份注射用水和70份乙醇的混合醇水溶液中，搅拌使其完全溶解，津腾0.22μm pes滤器过滤得到塞来昔布口服溶液剂，为无色透明液体。对其进行稳定性测试，加速试验条件是40
±
2℃，相对湿度55
±
5rh%，结果如下表5所示，说明在加速试验条件下，存放3个月，所得塞来昔布口服溶液剂的稳定性非常好，基本没有发生变化。
37.实施例3按照实施例2的方法将改性/未改性的环糊精和塞来昔布的包合物制成的塞来昔布口服溶液剂，其中包合物分别为包合物1
‑
4，包合物2
‑
4，包合物3
‑
4，包合物0
‑
3；以及使用市售的塞来昔布胶囊(西乐葆，200mg/粒，辉瑞制药有限公司)对比格犬（10
±
1kg，雌雄各半)进行药代动力学试验，以塞来昔布计给药剂量为20mg/kg，比格犬雌雄各半，随机分为实验组(包合物制成的口服溶液剂)和对照组(西乐葆)，实验组分别是刚配制的溶液剂(0天)和5次冻融试验后 (
‑
15℃，2d/40℃，2d)，每组比格犬8只，雌雄各半，药物禁食16h后分别灌胃给予上述溶液剂和胶囊剂，药代动力学数据如下表6所示：从表6可以看出，本发明利用4
‑
甲基丁内酯改性的磺丁基倍他环糊精钠和塞来昔布制得的包合物，在生物利用度方面比未改性的磺丁基倍他环糊精钠和塞来昔布制得的包合物稍差，但经过5次冻融试验后生物利用度基本没有下降，而未改性的环糊精和塞来昔布制得的包合物，经过5次冻融试验后，生物利用度下降较为明显。说明本发明采用4
‑
甲基丁内酯改性对磺丁基倍他环糊精钠进行改性后和塞来昔布制得的包合物是成功的，稳定性得
到了明显改善，更有利于药物的研发。
38.本发明还测试了4
‑
甲基丁内酯对磺丁基倍他环糊精钠改性后，是否会对最终产品的安全性产生影响，测试了溶解度较优的包合物1
‑
4对小鼠的急性毒性试验证实，以最大给药量0.5g/kg/d条件下经口灌胃，未见明显的毒性作用。给药后15天，对小鼠进行解剖，体表和脏器官未见明显异常。说明4
‑
甲基丁内酯对磺丁基倍他环糊精钠的改性是安全的。