DAF-FM DA，一氧化氮（NO）荧光探针，cas254109-22-3的使用说明书
作者：NG体育 发布时间：2022-08-12 09:37:51
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DAF-FM DA 一氧化氮（NO）荧光探针
DAF-FM DA是低浓度NO检测和定量试剂，DAF-FM的荧光信号能被荧光检测仪器检测到，包括流式细胞仪，荧光显微镜，荧光酶标仪等。
产品关键词：
DAF-FM DA；DAF-FM Diacetate；DAF-2 DA；Carboxy-PTIO；NO Scavenger 一氧化氮清除剂；SNP 一氧化氮供体；CAS NO. 254109-22-3；
产品描述
DAF-FM DA是一种细胞膜渗透性的一氧化氮（NO）荧光探针，Ex/Em=495/515nm。DAF-FM DA主动扩散穿透细胞膜，一旦进入细胞，胞内酯酶使其去乙酰化生成DAF-FM。DAF-FM本身荧光很弱，其荧光量子产率~0.005，但与NO反应后荧光增强约160倍，光量子达到~0.81。与早的NO探针-DAF-2相比，DAF-FM具有以下几个优势：1）DAF-FM与NO形成的加合物的光谱不依赖pH（＞5.5）；2）DAF-FM与NO形成的加合物的光稳定性明显强于DAF-2/NO加合物；3）DAF-FM的NO检测下限~3nM，比DAF-2灵敏度高（~5nM）。
本品以冻干粉形式提供，可用DMSO配制成储存液后，用适当的生理缓冲液或培养基稀释到所需工作浓度后进行探针加载。建议起始工作浓度范围是1-10μM。
对于用量比较少的用户，也可直接选择我司提供的DAF-FM DA（5mM in DMSO）。
产品特性
1） CAS NO：254109-22-3
2） 化学名：3′,6′-bis(acetyloxy)-4-amino-2′,7′-difluoro-5-(methylamino)-spiro[isobenzofuran-1(3H),9′-[9H] xanthen]-3-one
3） 英文同义名：DAF-FM Diacetate; 4-Amino-5-Methylamino-2′,7′-Difluorofluorescein Diacetate; 3-Amino, 4- aminomethyl-2ʹ,7ʹ-difluorofluorescein Diacetate; Diaminofluorescein-FM diacetate;
4） 中文同义名：DAF-FM二乙酸盐；二氨基荧光素-FM二乙酸盐；4-氨基-5-甲氨基-2′,7′-二氟荧光素二乙酸盐；3-氨基, 4-氨甲基-2ʹ,7ʹ-二氟荧光素二乙酸盐；
5） 分子式：C25H18F2N2O7
6） 分子量：496.42
7） 纯度：≥98%（HPLC）
8） 外观：浅黄色粉末
9） 溶解性：溶于DMSO（5mM）
10）化学结构：
保存与运输方法
保存：-20ºC避光干燥保存，2年。
运输：室温运输。
注意事项
1） BSA和酚红对DAF-FM的荧光检测有干扰，请避免体系内含有这些组分。
2） 为了您的和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
一、储存液制备
2.1 储存液制备
取低温保存的冻干粉置于室温回温-少20min，低速离心后，加入适量体积的无水DMSO配制成一定浓度的储存液。比如，往1mg DAF-FM DA（Mw：496.42）加入402.88μl DMSO，充分溶解后配制成5mM储存液。
2.2 储存液保存
为了延长储存液的保存时间，需根据单次用量分装避光冻存，以小化反复冻融次数。分装冻存的溶液-少稳定保存6个月。
2.3 工作液制备
于正式实验前，用合适的生理缓冲液或新鲜培养基取适量储存液稀释到工作浓度。工作液需现配现用，多余的工作液需丢弃。建议起始工作浓度范围是1-10μM。
二、操作步骤
【注意】：以下操作步骤仅做参考。佳的加载浓度、时间和温度需根据经验来调整。总的来说，以能达到检测需求的低浓度佳。通过降低加载温度能减缓亚细胞区室化现象。
2.1 细胞悬液或玻片上准备活细胞；
2.2 用适当缓冲液或新鲜培养基（不含血清和酚红）稀释DMSO储存液。建议起始工作浓度范围是1-10μM。
2.3 用稀释好的DAF-FM DA工作液孵育细胞20~60min，孵育温度为4~37℃。贴壁细胞不需消化后再加载。
2.4 用PBS, pH 7.4充分清洗细胞直-去除多余探针。更换新鲜缓冲液或培养基再孵育15~30min，使得细胞内酯酶能将探针充分去酯化。
2.5 激发和发射波长分别是495和515nm。因这些波长与荧光素（fluorescein）非常相似，因此，适用于荧光素（fluorescein）或FITC的检测系统都行。
cas254109-22-3，DAF-FM DA ，一种NO荧光探针
DAF-FM DA
DAF-FM 双乙酸盐
二氨基荧光素-FM 二乙酸酯
4-Amino-5-(N-methylamin)-3′,6′-bis(acetyloxy)
4-Amino-5-(N-methylamino)-3′,6′-bis(acetyloxy)-2′,7′-difluoro-spiro[isobenzofuran-1(3H),9′-[9H]xanthen]-3-one;DAF-FMDAsolution
DAF-FMDA(cellpermeable)
-[9H]xanthen]-3-one
4-Amino-5-(N-methylamino)-3′;7′;9′
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