FITC荧光标记如何标记蛋白质?新型FITC标记方法了解一下
作者:NG体育 发布时间:2022-08-11 09:51:28
次浏览
提供一种新型使用FITC来标记蛋白质的方法
1)制备溶于0.1m碳酸钠缓冲液(pH9.0)的待标蛋白溶液,浓度≥2mg/ml.
2)将FITC溶解在无水DMSO中,制成1mg/ml溶液。
3)将50μFITC溶液添加到1ml蛋白溶液中,可根据每次5μ量轻轻搅拌蛋白溶液;
4)加入所需FITC后,反应液在4°C避光孵化8h;
5)加入NH4CI,使其终浓度达到50mm,4°C终止反应2h;
6)加入二甲苯绿至0.1%,甘油至5%;
7)通过对尺寸和孔径合适的凝胶过滤层进行分析和分离,排除未结合的FITC,分离范围为2000-50000(球蛋白如抗体)。凝胶柱平衡后,从柱顶注入上述反应混合波,
打开凝胶柱,流入柱床后加入PBS缓冲液。
此时,可形成两条带:
a.快速移动带,即FITC-蛋白质标记物,**被洗掉,通常在室内光下可见;
B.慢速移动带,即FITC和二=甲苯绿,没有蛋白质结合。
仅在PBS缓冲液清洗后就被洗掉了。
8)将上述偶联物储存在4°C中,加入0.1%(w/v)叠氮化钠作为防腐剂。如果蛋白质浓度低(1mg/ml),可以加入1%BSA作为蛋白质稳定剂。
9)标记物中荧光素与蛋白质的比值(F/P)可通过测量495nm和280nm处的吸光值来识别,F/P应位于0.3-1.0。如果比例小,信号太低,如果比例高,背景太高。
是一家从事MOF,离子液体 ,PEG衍生物、科研试剂、多肽、光电材料、碳纳米管、纳米材料、脂质体、合成磷脂的研发、定制合成、生产和销售的高科技生物科技有限公司。
相关FITC荧光基团现货供应:
产品名称 规格
FITC-Dextran MW:20K 50mg
PLGA45000-PEG5000-FITC 10mg
FITC-Dextran MW:10K 50mg
FITC-Dextran MW:20K 50mg
FITC-Dextran MW:100K 50mg
FITC-Dextran MW:200K 50mg
FITC-Dextran MW:500K 50mg
FITC-Dextran MW:2000K 50mg
FITC-HRP 1mg
FITC-HRP 1mg
松香-FITC 100mg
FITC-dextran MW:1000K 10mg
FITC-Avidin 1mg(2.5mg/ml)
Fitc-青藤碱 1mg
Ovalbumin-FITC 1mg
FITC-仑伐替尼 1mg
PCL5K-PEG2K-FITC 1mg
LA-PEG3.4K-FITC 1mg
mPEG550-FITC 1mg
FITC-HA MW:50K 1mg
FITC-HA MW:500K 1mg
PEG2K-PLLA1.3K-FITC 1mg
PAA190-FITC 1mg
fitc-苯硼酸 1mg
FITC-介孔二氧化硅20-30nm 5mg/ml 1ml
FITC-Human fibrinogen 绿色荧光素标记人血纤维蛋白原 1mg
DOX-FITC 1mg