荧光素标记双孢蘑菇凝集素(ABL);FITC-ABL,Fluorescein labeled Agaricus Bisporus Lectin (ABL)
作者:NG体育 发布时间:2022-08-11 09:49:15
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**供应一系列的凝集素;同时提供各种荧光标记修饰偶联的凝集素。提供罗丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、琼脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red标记各种凝集素。
双孢蘑菇凝集素(ABL)是由两个至四个非常相似的分离蛋白组成,每个四聚体约17 kD亚基。这种凝集素结合Thomsen-Friedenreich抗原,也称为T-二糖,半乳糖基(β-1,3)N-乙酰半乳糖胺。不同于花生凝集素,它不结合唾液酸化的T抗原,ABL结合唾液酸化或无唾液酸化的形式。ABL结合所有血型和IgA亚类的O-连接聚糖。简单的一糖和二糖只具有轻微的。
琼脂糖结合的双孢蘑菇凝集素是用我们的亲和纯化凝集素制备的。以分子量排除极*约为2x107道尔顿的热稳定交联4%琼脂糖微球作为固相基质,凝集素与之共价偶联。小心地控制凝集素在珠子上的附着,以保持凝集素活性,并使结合凝集素的构象变化*小化,这可能导致非特异性的离子或疏水相互作用。我们开发的技术将凝集素偶联到琼脂糖珠上,在凝集素和基质之间插入亲水性间隔臂。
FITC标记凝集素的组织化学染色程序
1.组织切片经脱蜡处理,若是Bouin液固定的组织,用70%乙醇洗3次除去组织切片内的黄色后,再用蒸馏水漂洗;
2.PBS漂洗(含1%牛血清白蛋白)2次,每次5分钟;
3.加入FITC-凝集素(PBS适当*释),置湿盒内孵育,室温1小时;
4.PBS漂洗3次,每次5分钟;
5.水溶性封片剂封片,荧光显微镜观察。
6.结果 FITC标记的凝集素能直接与组织细胞内的糖基结合,从而显示糖基的位置,可用于检测组织细胞中的糖成分,阳性部位呈黄绿色荧光。
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