纳米金偶联抗体/蛋白试剂盒 (15nm-100ug偶联量) 的实验步骤
作者:NG体育 发布时间:2022-08-10 14:52:09
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纳米金偶联抗体/蛋白试剂盒
产品概述
纳米金偶联抗体/蛋白试剂盒可以通过抗体/蛋白上的伯胺基团(如赖氨酸),简单、快速地实现抗体/蛋白与纳米金的共价偶联。偶联在30分钟内即可完成,偶联效率可达70%左右。此为通用型试剂盒,适用于各种分子量的抗体/蛋白,也适用于多肽、酶等分子。
优点
1.操作便捷,反应快速。
2.偶联效率高,且延长反应时间不影响偶联效率。
3.此为通用型试剂盒。
4.实验结果重现性好。
试剂盒组成与存储
将试剂盒储存在-20⁰C。偶联剂、反应缓冲液可保存在+4℃或-20℃。
试剂盒组成
数量
保存温度
纳米金(20nm)
1管(20μg)/10×20μg/5×20μg
-20°C
反应缓冲液
1/5/10mL
-20°C/+4°C
偶联剂
1/5/10管
-20°C/+4°C
实验步骤
将所有的试剂恢复至室温。
1、取500μL反应缓冲溶液加入1管纳米金中,得到纳米金的分散液;取1管偶联试剂溶解于200μL纯水中。
2、取100μg抗体/蛋白加入至上一步的纳米金缓冲溶液中,在该混合溶液中,再加入100μL偶联试剂,混匀后在室温下持续30分钟左右。(注意:偶联试剂需现配现用!)
3、反应结束后以9500rpm,离心20分钟,纯水洗涤2~3次以除去未反应完的抗体/蛋白。
4.共轭抗体储存:标记抗体/蛋白后,我们建议将偶联物储存在+4°C,不要将偶联物储存在-20°C。偶联物的整体稳定性将由抗体/蛋白本身的稳定性决定,因为它会首先降解。如果您的抗体/蛋白稳定,偶联物也将稳定。
5.测量偶联物浓度:纳米金(20nm)的吸光度(Absmax)为528nm。为了确定纳米金偶联物的有效浓度,我们建议在将样品稀释到适合您的设备的适当范围后,使用紫外-可见分光光度计测量Absmax。
注意事项
本试剂盒可以兼容无胺缓冲液(PBS,MES,MOPS, HEPES)和<50%甘油。若样品抗体/蛋白中存在以下成分,可能会干扰样品抗体/蛋白与纳米金的偶联。
缓冲液组成
是否兼容
无胺缓冲液(如:PBS,MES,MOPS, HEPES)
是(pH6.5-8.5)
甘油
是(<50%)
Gelatin(明胶)
否
Tris
否
甘氨酸
否
羧酸分子(EDTA、柠檬酸等)
否
含伯胺基或巯基分子(氨基酸、乙醇胺、巯基乙醇或DTT等)
否
血清蛋白
否
若存在以上干扰成分,可先通过超滤管或透析等方式除去干扰成分,再使用本试剂盒将抗体/蛋白与纳米金偶联。
偶联抗体/蛋白量:偶联抗体/蛋白量将影响每个纳米金粒子表面的抗体/蛋白分子数量,偶联抗体/蛋白量取决于您的应用需求。因此,您可能需要偶联不同数量的抗体/蛋白,结合应用测试优化得到偶联抗体/蛋白量。下表显示了推荐的初始抗体/蛋白量。
纳米金质量
推荐的初始抗体/蛋白量
20μg
100μg
产品名称:纳米金偶联抗体试剂盒(15nm-100ug偶联量)
偶联蛋白的量:100ug偶联量
产品名称:纳米金偶联蛋白试剂盒(15nm-500ug偶联量)
偶联蛋白的量:500ug偶联量
产品名称:纳米金偶联蛋白试剂盒(15nm-1mg偶联量)
偶联蛋白的量:1mg偶联量
试剂盒名称 偶联蛋白的量
磷脂偶联蛋白试剂盒(5mg偶联量) 5mg偶联量
磷脂偶联蛋白试剂盒(20mg偶联量) 20mg偶联量
磷脂偶联蛋白试剂盒(50mg偶联量) 50mg偶联量
磷脂偶联蛋白试剂盒(100mg偶联量) 100mg偶联量
纳米金偶联蛋白试剂盒(15nm-100ug偶联量) 100ug偶联量
纳米金偶联蛋白试剂盒(15nm-500ug偶联量) 500ug偶联量
纳米金偶联蛋白试剂盒(15nm-1mg偶联量) 1mg偶联量
Cy3荧光标记蛋白试剂盒(10~100mg标记量) 10-100mg偶联量
Cy5荧光标记蛋白试剂盒(10~100mg标记量) 10-100mg偶联量
Cy5.5荧光标记蛋白试剂盒(10~100mg标记量) 10-100mg偶联量
Cy7荧光标记蛋白试剂盒(10~100mg标记量) 10-100mg偶联量