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常用的PEG修饰蛋白质以及活化方法有哪些?

作者: 发布时间:2022-08-08 09:52:49 次浏览

PEG蛋白质的修饰主要是通过PEG末端羟基与蛋白质氨基酸残留的反应来实现的,而PEG末端羟基的活性很差。   为了在体内温和的条件下共同修饰蛋白质,必须使用活化剂进行活化。     常用的PEG活化方法包括:   (1)二咪唑法:该方法最早用于多肽合成,被证明是形成酰胺键的好试剂。   (2)N-羟基琥珀酰亚胺法:(a)N、N-琥珀酰亚胺碳酸酯活化,这种反应也需要在无水条件下进行。(B)琥珀酸酐和N-羟基琥珀酰亚胺活化。该方法活化的聚乙二醇活性较高。**偶尔在非水环境中连接蛋白质。   (3)氰脲酰氯法:氰脲酰氯,又称三氯化嗪(TST),是一种对称的杂环化合物。只有一个氯原子被TST和聚乙二醇上的羟基反应所取代,其他氯原子与蛋白质氨基反应。   (4)光气参与活化方法:Kurfuerst在其专利中提到了一些方法,即用N-羟基琥珀酰亚胺钾盐、硝基苯酚、三氯苯酚和光气反应制备活化聚乙二醇。活化主要分为两个步骤,如下图所示。   (5)聚乙二醇对蛋白质半胱氨酸残基的化学修饰,以谷氨酰胺酶(G-TGase)为例。除了传统的化学修饰方法外,还可以通过酶催化来修饰,以谷氨酰胺酶(G-TGase)为例。   最后,选择合适的蛋白质氨基酸残留点或小分子**点进行定点修改。用活性PEG修改合适的蛋白质氨基酸残留基,提高天然蛋白质的疗效。
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