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Dextran-FITC、葡聚糖-荧光素、FITC标记葡聚糖

作者:Dextran-FITC、葡聚糖-荧光素、FITC标记葡聚糖 发布时间:2022-10-18 09:33:52 次浏览

Dextran-FITC、葡聚糖-荧光素、FITC标记葡聚糖
CAS NO: 60842-46-8
英文名称:: Dextran(3,6'dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H],9-[9H]xanthen]-5(or 6]-yl]carbamothioate, average Mw of approximately
分子量:4000, 5000, 6000, 7000, 9000, 10000, 20000, 40000, 70000等等,最高可做到2000k
溶解性:易溶于水或盐溶液,也溶于DMSO,甲酰胺和某些其他极性有机溶剂,不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺(DMF)
储存:2-8℃避光长期保存,保持密封干燥,至少3年稳定
FITC标记葡聚糖(FITC-Dextran)是以天然葡聚糖B512F限制水解和分级纯化制备的不同分子量葡聚糖为底物,经荧光素标记所得的合成探针
荧光素基团通过一个稳定的硫代氨甲酰健连接到葡聚糖上,此标记步骤不会引起任何的葡聚糖降解
FITC-Dextran内每个葡萄糖单位含0.002~0.008 mol FITC,这一低水平的替换确保葡聚糖最小的结构变化,这一特性对渗透性研究来说是最基本需求
FITC标记葡聚糖(FITC-Dextran)广泛用于微循环和细胞通适性研究,通过荧光显微测定法来检测
还可用于植物细胞壁多孔性和毛细血管通透性研究
血浆蛋白不会结合FITC-Dextran
FITC标记葡聚糖(FITC-Dextran)还可以用于心血管、微循环、灌注、细胞单层和细胞膜渗适性研究,作为一种荧光流动示踪化合物,来支持对血流、膜损伤、血管引流和肾清除等过程的测定
FITC-Dextran40可能用于研究细胞内吞行为
也可能用于研究内皮单细胞层孔隙度和细胞层内顶端到基底膜的运动
本材料是对平均分子量约4kDa葡聚糖进行标记的荧光素衍生物,即异硫 酸荧光素葡聚糖4(fluorescein isothiocyanate dextran 4,FITC-dextran,FD4),以冻干粉形式提供,易溶于水,最大激发和发射波长分别为493和520nm
综合各种溶液体系和温度下FITC-Dextrans的稳定性测定,总的来说,体内外FITC-Dextrans的稳定性非常优秀
仅当pH>9和上升温度内荧光素可能存在水解的风险
兔血浆、肌肉匀浆液、肝脏匀浆液和尿液内的FITC-Dextrans在37°℃,至少3天内保持稳定,分子量不会发生变化,且末发现荧光素基团的释放
6%三氯乙酸内FITC-Dextrans室温稳定保存3天

【文献来源:P.Kurtzhals,C.Larsen and M.Johansen,High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】
硫代氨甲酰键的水解产生4-或5-氨基荧光素,能立即被HPLC定量检测到
未发表的研究数据显示,将高压处理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃长达5个月,发现仅在50℃情况下可能观察到微量(1%)的自由氨基荧光素含量增加
单独进行高压处理会引起2.7%的自由氨基荧光素产生
其他的未发表研究显示,FITC-Dextran在pH4溶液35℃内能稳定保存高达1年
而在pH4,80℃内硫代氨甲酰键稳定30min,可能观察到葡聚糖的降解
pH9,35℃内存放一个月以上会发生一定量(24%)的荧光衰减
一些研究证明,FITC-Dextrans在持续性实验(1-6天)的体内稳定性

【文献来源:N.Thorball,FITC-dextran tracers in microcirculatoryand permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.]
注意事项
FITC-Dextrans易溶于水或盐溶液,可根据实际使用浓度配制适当浓度的母液
FITC-Dextrans溶液高压灭菌可能导致少量氨基荧光素的释放,若需要无菌,建议用过滤的方法来除菌
上下游材料:
Dextran-COOH 葡聚糖羧基
Dextran-FITC 葡聚糖荧光素
Dextran-NH2 葡聚糖氨基
Dextran-SH 葡聚糖巯基
Dextran-MAL 葡聚糖马来酰亚胺
Dextran-Rhodamine 葡聚糖罗丹明
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